大鼠心型脂肪酸結(jié)合蛋白elisa試劑盒使用說明書

                 大鼠心型脂肪酸結(jié)合蛋白elisa試劑盒使用說明書

公司是一家專注于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域的高科技企業(yè)，企業(yè)經(jīng)營(yíng)進(jìn)出口生物試劑、耗材等，所經(jīng)營(yíng)銷售的范圍也在日益的增長(zhǎng)和擴(kuò)大。在常規(guī)試劑和中間體的基礎(chǔ)上也包括實(shí)驗(yàn)儀器、消耗品、普通器材,分子生化試劑、免疫試劑和細(xì)胞培養(yǎng)試劑等，在滿足試驗(yàn)和生產(chǎn)的常規(guī)需求以外,逐漸過渡到應(yīng)用于廣大的研究機(jī)構(gòu)和嶄新課題。由單一的試劑供應(yīng)過渡到可以根據(jù)客戶需求,提供全方位的定制加工和全線的產(chǎn)品推薦,選擇采購(gòu)服務(wù)。 我們相信,在不懈的努力下,一定會(huì)把上海滬峰建成集生產(chǎn)、研究開發(fā)和銷售于一體的國(guó)內(nèi)外知名的一流企業(yè)。

大鼠elisa試劑盒使用目的：
　　本試劑盒用于測(cè)定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中心型脂肪酸結(jié)合蛋白（H-FABP）含量。
實(shí)驗(yàn)原理
　　本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠心型脂肪酸結(jié)合蛋白（H-FABP）水平。用純化的大鼠心型脂肪酸結(jié)合蛋白（H-FABP）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入心型脂肪酸結(jié)合蛋白（H-FABP），再與HRP標(biāo)記的心型脂肪酸結(jié)合蛋白（H-FABP）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的心型脂肪酸結(jié)合蛋白（H-FABP）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠心型脂肪酸結(jié)合蛋白（H-FABP）濃度。

大鼠elisa試劑盒組成
1 30倍濃縮洗滌液 20ml×1瓶 7 終止液 6ml×1瓶
2 酶標(biāo)試劑 6ml×1瓶 8 標(biāo)準(zhǔn)品（1600pg/ml） 0.5ml×1瓶
3 酶標(biāo)包被板 12孔×8條 9 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 1.5ml×1瓶
4 樣品稀釋液 6ml×1瓶 10 說明書 1份
5 顯色劑A液 6ml×1瓶 11 封板膜 2張
6 顯色劑B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1個(gè)

標(biāo)本要求
1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2．不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

大鼠elisa試劑盒操作步驟
標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
溫育：操作同3。
洗滌：操作同5。
顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。