石蠟切片機手動、半自動和自動切片類型簡介

Leica有多種型號的石蠟切片機。常規(guī)石蠟切片有手動、半自動和電動之分。價格也成梯度。

目前，國內(nèi)外大多數(shù)的科研工作者都以切片機預(yù)設(shè)的切片厚度值作為組織切片真實厚度的默認(rèn)值，很少有人探究組織切片厚度的變化可能會對觀察和評測結(jié)果造成多大影響。

實際中，同一組織樣本不同厚度的切片在顯微鏡下觀察時，薄組織切片的顏色往往淡于厚切片，如果以鏡下觀察的顏色深淺來定性判斷被檢測化學(xué)物質(zhì) （包括抗原或抗體）的有無，則可能因為組織切片較薄而被認(rèn)為是陰性的結(jié)果。

同時，組織切片較薄、顏色太淺不但對組織細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)和化學(xué)物質(zhì)的定位觀察產(chǎn)生影響，而且更會因為切片厚度的不恒定，可極大地動搖定量分析結(jié)果的可靠性。

即使在恒定切片機厚度刻度值的條件下手動切片，同一組織切片內(nèi)及相鄰的組織切片之間也常會出現(xiàn)肉眼可見的表現(xiàn)為顏色深淺不一的厚度差異。

切片厚度受制片過程中多種因素的影響，例如：切片刀的鋒利程度、切片時的環(huán)境溫度、切片的速度、石蠟的熔點和硬度及韌性等。

下面就手動和自動兩種切片的厚度差異在這里做個介紹，這種差異的結(jié)果是經(jīng)采用二次包埋法進(jìn)行重切片，用圖像分析儀測量組織切片的實測厚度，觀察組織切片實測厚度的變化而得出的，其可為組織、細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)和化學(xué)物質(zhì)的定性與定位觀察及定量分析結(jié)果的評價提供參考。 
 

1、分析結(jié)果顯示：手動和自動切片對組織切片的實測厚度有顯著性差異 （p<0.05）組織種類對組織切片的實測厚度無顯著性差異 （p>0.05）。

2、各組織切片的厚度測量均值均較切片機預(yù)設(shè)厚度值大，同一切片機預(yù)設(shè)厚度值條件下，自動切片的實測厚度均值均小于手動切片，且更接近切片機預(yù)設(shè)刻度值。

3、相同組織的組織切片實測厚度的極端離散趨勢 （極差）隨切片機預(yù)設(shè)厚度值的增加而呈現(xiàn)上升趨勢，且手動切片組的極差大于自動切片組，但兩組之間的極差比較尚沒有統(tǒng)計學(xué)意義。

4、盡管石蠟包埋組織切片的制備方法已得到不斷的改良定型，但是，切片機預(yù)設(shè)的切片厚度值與組織切片的實測厚度值間的差異情況仍不能為人們所忽視，它對評判組織細(xì)胞結(jié)構(gòu)的形態(tài)和化學(xué)物質(zhì) （包括抗原或抗體）有無和多少將產(chǎn)生影響，應(yīng)引起高度的重視。

5、切片機預(yù)設(shè)的切片厚度刻度值與組織切片的實測厚度值之間有10%以上的差異，切片機標(biāo)示厚度與實測厚度間的平均誤差為17.2%。
 

• 實驗獲得的組織切片厚度變化的研究結(jié)果表明切片機的切片厚度預(yù)設(shè)值低估了石蠟包埋組織切片的真實厚度，實驗切片機預(yù)設(shè)切片厚度與手動和自動切片厚度相差較大。

   

• 其主要原因是由于切片機作自動切片時其切片的速度恒定，石蠟包埋的組織受力均勻，而手動切片時的切片速度難以恒定，致使石蠟包埋的組織受力不均勻，切片機的使用年限越久，活動機械連接的間隙越大，產(chǎn)生實際切片的厚度大于或小于切片機預(yù)設(shè)切片厚度的機會越大。

   

• 如使用的切片機為全新的，則實測切片厚度均大于而不小于切片機預(yù)設(shè)切片厚度，而使用年久的手動切片機，其實測切片的厚度有不少小于切片機預(yù)設(shè)切片厚度，這與上述分析相吻合的。

實際操作表明全自動切片機的切片速度快慢的設(shè)置與切片機輪轉(zhuǎn)速度有關(guān)，但對石蠟包埋組織蠟塊切片瞬間的速度并未產(chǎn)生明顯影響。

手動切片的速度是以操作者個人主觀感覺來控制的，難以保證恒定的切片速度，其組織切片間厚度的差異更大，這與實驗結(jié)果的極差是相符的。

通過觀察組織切片厚度的變化，發(fā)現(xiàn)不同切片方法對組織切片真實厚度有影響，自動切片的組織薄片的實測厚度與預(yù)設(shè)厚度刻度值的差異小于手動切片，自動切片獲得的組織切片的精度更高，優(yōu)于手動切片。

因此，石蠟切片機的手動、半自動和自動切片機究竟該怎么選呢？

只要條件允許，盡量選擇一款優(yōu)質(zhì)的全電動切片機！