糖基化是蛋白質藥物極其關鍵的質量屬性,對產品的活性、穩定性均有重大影響。因此,糖基化是蛋白藥物必須研究的翻譯后修飾。
普信可采用多重策略對蛋白質產品的糖基化進行分析:
服務策略1:全分子量水平
使用UPLC-MS檢測產品的全分子量,通過對比序列,得出其糖基化修飾。
服務策略2:亞基分析
使用IdeS 酶將單抗類產品降解成亞基,而后通過UPLC-MS對各個亞基進行分子量分析,對照序列得出其糖基化修飾。
服務策略3:糖肽分析
使用Trypsin對樣品進行酶解,而后使用UPLC對糖肽進行分離,在線LC-MS/MS檢測(CID/HCD或ETD),對照理論序列得出糖基化修飾。
服務策略4:N-糖糖苷分析
使用PNGase F釋放出蛋白質的N糖糖苷并2-AB標記,再使用HILIC柱對糖苷標記產物進行LC-MS分離并檢測分子量,用以鑒定糖苷類型。
技術優勢
可采用多重策略對蛋白質產品的糖基化進行分析
鑒定分析耗時相對較短
檢測靈敏度高,重復性好
案例分析
