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          CRISPR/Cas9 基因敲除技術(shù)服務(wù)
          (CRISPR)/CRISPR-associated (Cas) 是細(xì)菌和古細(xì)菌一種不斷進(jìn)化適應(yīng)的免疫防御機(jī)制。CRISPR/Cas9利用一段小 RNA 來(lái)識(shí)別并剪切DNA以降解外來(lái)核酸分子。
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          最后更新:2013-8-12半年訪問(wèn):80
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          (CRISPR)/CRISPR-associated (Cas) 是細(xì)菌和古細(xì)菌一種不斷進(jìn)化適應(yīng)的免疫防御機(jī)制。CRISPR/Cas9利用一段小 RNA 來(lái)識(shí)別并剪切DNA以降解外來(lái)核酸分子。

              剛剛發(fā)表在《科學(xué)》(Science)(2013年,1,3)的兩篇文章,證明Cas9系統(tǒng) 能在293T, K562, iPS等多種細(xì)胞中,進(jìn)行有效的靶向酶切,非同源重組(NHEJ)、同源重組 (HR)效率在3-25%之間,與TALEN酶切效果相當(dāng)。文章還證明,多個(gè)靶點(diǎn)可以同時(shí)進(jìn)行靶向酶切。這些工作將進(jìn)一步靶向基因操縱推向高潮,使得多個(gè)基因敲除、敲入變得更為簡(jiǎn)單、高效。雖然目前,大家對(duì)該技術(shù)的特異性,免疫原性還了解甚少,但是隨著研究的不斷深入,一定會(huì)有很大的改善。在未來(lái)的2-3年,動(dòng)植物育種、干細(xì)胞定向分化、遺傳疾定點(diǎn)修復(fù)等等都將得到迅猛的發(fā)展。


          圖1. RNA指導(dǎo)的CRISPR/Cas9基因剪切系統(tǒng)

           

           

              唯尚立德已經(jīng)利用CRISPR/Cas9在斑馬魚(yú),哺乳動(dòng)物細(xì)胞上成功實(shí)現(xiàn)基因敲除和基因敲入,現(xiàn)推出如下技術(shù)服務(wù):

              1. 應(yīng)用CRISPR /Cas9提供穩(wěn)定細(xì)胞系靶向基因敲除、敲入技術(shù)服務(wù);
              2. 應(yīng)用CRISPR /Cas9提供模式生物靶向基因技術(shù)服務(wù),包括小鼠,大鼠,斑馬魚(yú)等;

           

           

           


              兩篇science 文章證明CRISPR /Cas9系統(tǒng)在哺乳動(dòng)物細(xì)胞有效

              RNA-Guided Human Genome Engineering via Cas9 Science. 2013 Feb 15 339(6121):823-6.
              http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/23287722

              Multiplex Genome Engineering Using CRISPR/Cas Systems Science. 2013 Feb 15 339(6121):819-23.
              http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/23287718

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