檢測原理
本試劑盒采用TaqMan探針法熒光定量PCR技術,針對組織胞漿菌(包括莢膜組織胞漿菌及其變種)的高度保守基因序列設計特異性引物和探針,通過實時熒光信號擴增曲線定量檢測樣本中的病原體核酸。
產品特點
高靈敏度:可檢測低至個位拷貝數的靶基因,適用于微量樣本分析。
強特異性:引物及探針經嚴格優化,避免與其他病原體核酸發生交叉反應。
穩定性優:復孔間變異系數(CV)<5%,實驗結果重復性高。
快速便捷:即開即用,用戶僅需提供樣本RNA或DNA模板。
配套完善:含陽性對照(標準品)和內參系統,便于區分假陰性結果。
適用范圍
科研用途:適用于臨床前研究、流行病學調查及實驗室驗證。
樣本類型:新鮮或冷凍組織(避免反復凍融)、血液、培養物等。
試劑盒組分
| 組分名稱 | 規格(50次反應) | 保存條件 |
| PCR反應預混液 | 1 mL | -20℃避光 |
| 探針及引物混合液 | 200 μL | -20℃避光 |
| 陽性對照 | 50 μL | -20℃(單獨保存)|
| RNase-free水 | 1 mL | 室溫 |
操作步驟
樣本處理:
使用新鮮樣本或-80℃保存的RNA/DNA,避免反復凍融。
按標準方法提取核酸,建議濃度≥10 ng/μL。
PCR體系配制(20 μL/反應):
預混液10 μL + 探針引物混合液2 μL + 模板5 μL + RNase-free水3 μL。
擴增程序:
預變性:95℃ 3 min → 循環階段(40次):95℃ 15 sec → 60℃ 30 sec(熒光采集)。
數據分析:
使用儀器配套軟件分析Ct值,通過標準曲線計算拷貝數。
注意事項
避免Buffer AL等試劑低溫沉淀,使用前需室溫平衡或37℃預熱。
擴增片段建議控制在1 kb以內以確保效率。
電泳時禁用含SDS的Loading Buffer,防止拖尾現象。
本產品僅限科研,不可用于臨床診斷。
儲存與運輸
保存條件:-20℃避光保存,有效期12個月。
運輸方式:低溫干冰運輸,確保試劑活性。
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