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核心特點
高特異性：引物針對保守區設計，避免與其他微生物交叉反應。
高靈敏度：檢測下限為10~100拷貝/μL，支持5個數量級的定量線性范圍。
便捷性：預混優化試劑，即開即用，僅需提供DNA模板。
質控保障：含無傳染性DNA片段作為陽性對照，區分假陰性結果。
適用范圍：科研用途，適用于灰馬杜拉分枝菌DNA的定性或熒光定量PCR檢測。
使用方法
樣本準備
DNA提取：建議使用兼容的病毒DNA提取試劑盒（如柱式法），試劑盒可能附帶裂解液試用裝。
標準曲線制備（定量檢測時需操作）：
將陽性對照（1×10^8拷貝/μL）按10倍梯度稀釋至6個濃度（10^2~10^7拷貝/μL），獨立操作避免污染。
稀釋液為配套熒光PCR模板稀釋液。
PCR反應體系
反應條件：
擴增程序需根據引物特性設定，常規包括預變性（95℃）、變性-退火-延伸循環（30~40次）。
推薦擴增片段長度200~500bp，引物濃度0.1~1 μmol/L。
注意事項
操作分區：核酸提取、試劑配制、擴增需在獨立區域進行，防止交叉污染。
試劑解凍：使用前需完全解凍并離心混勻。
引物設計原則：
長度20bp左右，GC含量40%~60%，避免二級結構及3'端互補。
質量控制與結果解讀
陽性對照：確認試劑有效性及擴增條件優化。
陰性對照：排除試劑或環境污染。
定量分析：通過標準曲線計算樣本中靶DNA拷貝數。
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