產品特點
即開即用:用戶僅需提供樣品RNA模板,無需額外優化引物或探針。
高靈敏度:引物及探針經特異性設計,可檢測低拷貝數目標序列(靈敏度達幾百拷貝/反應)。
高特異性:針對轉輪蟹高度保守區域設計,避免與其他病毒RNA交叉反應。
內置對照:提供陽性對照,有效區分假陰性結果。
防污染設計:一管式熒光定量PCR檢測,減少開蓋操作導致的污染風險。
試劑盒組成
A袋:
2×qPCR MagicMix(500 μL)
微量核酸稀釋液(熒光PCR專用,1 mL)
PCR引物混合物(100 μL)
B袋:
基因陽性對照(50 μL,86 bp DN段,非活體樣品)
DNA病毒裂解液試用裝(9 mL,可進行15次裂解反應)
其他:操作說明書1份
實驗流程
樣品制備:
使用推薦方法(如病毒DNAout試劑)提取樣品RNA/DNA,或直接使用兼容的純化產物。
陽性對照稀釋(示例):
按10倍梯度稀釋陽性對照(10²~10⁷拷貝/μL),獨立操作以避免污染。
PCR反應體系:
每20μL反應體系包含2×qPCR MagicMix、引物探針混合物及模板。
熒光定量PCR程序:
預變性(95℃, 5 min)→ 循環擴增(95℃ 10 s, 60℃ 30 s, 40 cycles)。
注意事項
操作環境:建議在潔凈實驗區分區操作,避免氣溶膠污染。
質量控制:每次實驗需包含陰性對照及標準曲線。
數據解讀:Ct值≤35且擴增曲線呈S型視為陽性結果。
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