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產品概述
本試劑盒基于PCR技術，專用于檢測轉基因植物中Cry1A(c)基因的核酸成分。通過特異性引物擴增目標DNA片段，結合熒光探針或電泳分析，實現高靈敏度、高特異性的定性檢測。適用于玉米、棉花、大豆等農作物及其加工產品的轉基因成分篩查。
檢測原理
采用實時熒光定量PCR（qPCR）或常規PCR技術：
DNA提取：從樣本中提取基因組DNA。
擴增反應：使用Cry1A(c)基因特異性引物和探針（若為qPCR），通過熱循環擴增目標序列。
結果判讀：
qPCR：通過熒光信號閾值（Ct值）判定陽性/陰性。
常規PCR：通過凝膠電泳觀察目標條帶（如預期大小）。
試劑盒組成
PCR反應混合液：含DNA聚合酶、dNTPs、緩沖液等。
Cry1A(c)引物探針混合液：特異性擴增Cry1A(c)基因。
陽性對照：含Cry1A(c)基因的標準質粒DNA。
陰性對照：無轉基因成分的植物DNA。
DNA提取試劑（可選）：用于樣本前處理。
操作步驟
樣本制備：按標準方法提取樣本DNA，濃度建議≥20 ng/μL。
反應體系配置：
在PCR管中加入模板DNA、反應混合液、引物探針混合液，補足無核酸酶水至25 μL。
PCR程序：
預變性：95℃ 5分鐘；
循環階段：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（40循環，qPCR需采集熒光信號）。
結果分析：
qPCR：Ct值≤35為陽性；
常規PCR：電泳確認目標條帶。
注意事項
防污染措施：
使用無菌一次性耗材，分區操作（樣本處理、PCR配置、擴增區分離）。
穿戴手套及實驗服，避免交叉污染。
試劑保存：
引物探針混合液避光保存于-20℃；
其他組分-20℃長期保存，避免反復凍融。
質量控制：
每批次實驗需包含陽性和陰性對照；
若對照結果異常，需重新檢測。
性能參數
靈敏度：可檢測≥0.1%的轉基因成分。
特異性：與常見Cry1A亞型（如Cry1Ab）無交叉反應。
局限性
僅適用于DNA水平檢測，不適用于RNA或蛋白表達分析。
樣本中PCR抑制劑可能導致假陰性，建議進行DNA質量驗證。
儲存與有效期
未開封試劑盒：-20℃保存，有效期12個月；
開封后：按組分要求分裝保存，避免反復凍融。
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