產品概述
本試劑盒采用實時熒光定量PCR(qPCR)技術,專用于檢測水稻及其衍生產品中轉基因品系LLRICE601的特異性基因序列(如PAT基因及品系特異性邊界序列)。適用于食品安全監(jiān)管、進出口檢驗及科研領域,具備高靈敏度、高特異性和快速檢測特點。
核心特點
高靈敏度:檢測限≤0.1%(低濃度樣本),可識別個位拷貝數的目標基因。
高特異性:引物探針設計嚴格匹配LLRICE601序列,避免與其他動物或植物DNA交叉反應。
穩(wěn)定性強:復孔間差異小,實驗結果重復性高。
抗干擾性:適用于深加工樣本(如高溫處理、水解蛋白等)。
快速檢測:1.5-2小時內完成(含DNA提取步驟)。
自動化兼容:適配ABI 7500、Bio-Rad CFX96等主流熒光PCR儀。
操作流程
分區(qū)操作要求
試劑準備區(qū):配置反應體系,需使用無核酶耗材。
樣本處理區(qū):在生物安全柜中操作,避免RNA降解(0-4℃環(huán)境)。
PCR擴增區(qū):獨立儀器與耗材,禁止跨區(qū)混用。
通用要求:各區(qū)配備紫外線殺菌裝置,吸頭需帶濾芯。
實驗步驟
DNA提取:推薦配套溶菌酶破壁步驟提取模板DNA。
qPCR反應:
反應體系:預混液(20 μL) + 引物探針 + 模板DNA。
每次實驗需設置陰、陽性對照。
擴增程序:按儀器標準熒光定量PCR程序運行(具體參數需參考儀器說明書)。
注意事項
試劑處理:
使用前充分融化混勻并瞬時離心。
陰/陽性對照需單獨存放于標本準備區(qū)。
操作規(guī)范:
嚴格按加液順序和時間操作,避免孔間溫育差異。
底物避光保存,有毒物質需佩戴防護用具。
防污染措施:
使用一次性吸頭,避免交叉污染。
酶標板洗滌后充分拍干,勿直接接觸吸水紙。
儲存條件:
未使用試劑立即密封,按標簽溫度保存(避免反復凍融)。
不同批號試劑禁止混用。
適用樣本與性能驗證
樣本類型:水稻葉片、種子、米粉等原材料及加工制品。
性能驗證:擴增效率≥90%,熒光信號強度符合國際標準。
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