BIO-RAD伯樂QX200數字PCR儀性能描述:最準確、最靈敏的數字 PCR 解決方案,具有廣泛的應用;靈活的數字 PCR 化學方法,已針對 TaqMan 水解探針和 EvaGreen 測定進行優化;靈活的測定設置,可通過擴展實現高度的靈敏性或較大的通量;簡便而易用的工作流程,通量達 96 個樣品;QX200 Droplet Digital 技術的微滴劃分功能可減;擴增效率和 PCR 抑制劑的影響;便捷的測定設計,不需要標準曲線
伯樂QX200微滴式數字PCR儀主要用途:癌癥生物標志研究和拷貝數變異分析 ;病原體檢測 ;新一代測序 ;基因表達分析,冠狀病毒分析
原廠標準配置:1864002+1864003+1814000+1864007+1814040+12001925
伯樂QX200 Droplet Digital PCR系統(貨號1864001)的優點
最準確、最靈敏的數字 PCR 解決方案,具有廣泛的應用
靈活的數字 PCR 化學方法,已針對 TaqMan 水解探針和 EvaGreen 測定進行優化
靈活的測定設置,可通過擴展實現高度的靈敏性或較大的通量
簡便而易用的工作流程,通量達 96 個樣品
QX200 Droplet Digital 技術的微滴劃分功能可減少擴增效率和 PCR 抑制劑的影響
便捷的測定設計,不需要標準曲線
Bio-Rad微滴式數字PCR技術(ddPCR)是第三代PCR技術,無需標準參照物質即可給出樣本的拷貝數濃度而非Ct值,其檢測結果為判讀提供量化的依據。根據LOB(limit of blank)和未知樣本的定量結果作出判讀,可避免人為錯誤,縮小灰區,提高檢出率。 ddPCR獨有的微滴處理技術,使其對PCR擴增效率的變化不再敏感,不懼含有PCR抑制物樣本的挑戰。隨著疫情的變化以及流行病學調研的推進,更多類型的檢測乃至環境監測也可能需要進行,ddPCR的這一優勢會發揮作用。此外,如果新型冠狀病毒發生變異,病毒基因序列上引物、探針靶向位置出現SNV,ddPCR亦能克服引物、探針結合能力下降帶來的擴增效率變化,確保穩定檢出。不僅如此,還能根據樣本微滴熒光信號的變化,發現引物探針靶標區域可能出現變異的病例,為NGS測序分析病毒變異提供樣本,助力流行病學研究。
QX200 Droplet Digital PCR 系統的應用領域
癌癥生物標志研究和拷貝數變異分析
以卓越的靈敏度和解析能力測量癌癥突變的變異程度、檢測稀有的 DNA 靶拷貝以及解析拷貝數變異狀態。
病原體檢測
采用極為精確的 QX200 系統對靶 DNA 或 RNA 分子中的細微變化進行定量分析,從而檢測和監測病原體。
新一代測序
無需使用標準曲線,直接對 NGS 庫執行絕對定量分析。
基因表達分析
對少量 mRNA 和 miRNA 的細微變化進行可靠和可重復的檢測。
環境監測
使用 QX200 系統可測試多種環境樣品,例如土壤和水。
食品檢測
采用經過驗證的 ddPCR 方法對轉基因生物體 (GMO) 進行評估。
Droplet Digital PCR 技術和工作流程
QX200 Droplet Digital PCR 系統由兩個儀器(QX200 微滴生成儀和 QX200 微滴分析儀)及其相關的消耗品構成。
QX200 液滴生成儀用于將 PCR 反應生成 20,000 個納升大小的液滴。在使用熱循環儀進行 PCR 后,QX200 微滴分析儀將逐個分析每個樣品中的液滴。微滴被吸入后,管路將分解乳化的液滴,并使它們依次通過一個雙色光學檢測系統。每次運行最多可處理 96 個樣品。系統將計算陽性和陰性微滴的數量,從而以數字格式對靶 DNA 進行絕對定量分析。此外,對于經過 PCR 的液滴,還可以提取擴增的產品以用于下游環節,例如測序或克隆。

其他儀器
QX200 Droplet Digital PCR 系統需要使用配備 96 深孔反應模塊的 C1000 Touch

熱循環儀和 PX1

PCR 熱封儀。
必備附件:
DG8 微滴發生卡
DG8 密封墊
發生卡底座
QX200 微滴發生油(用于 EvaGreen 測定)
微滴發生油(用于探針)
微滴分析油
ddPCR 試劑(用于基于 EvaGreen 或 TaqMan 水解探針的領域)
QX200 ddPCR EvaGreen 預混液
ddPCR 預混液(用于探針)
Droplet PCR 預混液
一步法 RT-ddPCR 試劑盒(用于探針)
BIO-RAD數字PCR儀(QX200)技術指標
| 起始樣品大小,µl |
20 |
| QX200 微滴生成儀容量 |
1–8 個樣品 |
| 每 20 µl 樣品的微滴數 |
1–96 個樣品 |
| 樣品光源 |
發光二極管 |
| 樣品檢測 |
多像素光子計數器 |
| 檢測通道 |
FAM (EvaGreen)、HEX (VIC) |
| 線性動態范圍 |
5 數量級 |
| 精度 |
±10% |
| 每個 96 孔板的液滴數,百萬 |
~1.5 |
| QX200 微滴生成儀尺寸(寬 x 深 x 高) |
28 x 36 x 13 cm (11 x 14 x 5") |
| QX200 微滴分析儀尺寸(寬 x 深 x 高) |
66 x 52 x 29 cm (26 x 20 x 11") |
內容簡述:
自2012年首次檢測到中東呼吸系統綜合癥冠狀病毒(MERS-CoV)以來,核酸擴增技術(NAT)一直是用于快速檢測MERS-CoV的最常用的技術。開發穩定、安全的陽性標準品以評估核酸擴增檢測的可靠性,并在不同的實驗室中執行外部質量評估(EQA)有重要的意義。在這項研究中,MERS-CoV RNA片段包括upE,ORF1b和N被包裝在人類免疫缺陷病毒1型(HIV-1)顆粒中。利用ddPCR方法,發現凍干的病毒樣顆粒(VLP)核酸在37°C或更低溫度下穩定,不僅可以安全地用作PCR檢測MERS-CoV的對照材料,而且還可以用作EQA的參考材料。在中國寧波國際旅行醫療中心組織的一次EQA中,有49家參與機構在使用各種商業診斷試劑盒和不同提取方法檢測MERS-CoV時,雖然有相對一致的結果,但同一樣品在不同實驗室報告的Ct值不同,這意味著需要對實驗室之間的RNA提取方法和/或PCR檢測條件進行標準化。
結論:
QX200可用于陽性標準品的標定,且可獲得比qPCR更一致的結果。在實際工作中,可以解決沒有陽性對照的情況下的檢測結果準確性問題。
借鑒意義:
ddPCR可以不依賴于標準品實現絕對定量,結果可靠,還可以用于不同試劑盒之間的性能比較、驗證。對追蹤到的密切接觸者并接受醫學觀察的疑似人員進行早期篩查時,可考慮使用ddPCR進行核酸檢測,早發現早隔離、早治療防擴散。
bio-equip.com
上海艾研生物科技有限公司于2011年創建,是一家聚焦于為生命科學科研實驗室提供一流產品與技術服務的高科技服務型企業;上海艾研生物專注于國內外領先的實驗儀器設備,實驗室耗材,生物試劑及生物信息學軟件的引進和推廣,為生命科學研究實驗用戶提供專業、可靠和便捷的服務。核心客戶群涵蓋全國的三甲醫院、疾病預防控制中心、知名大學、中科院等領域。
本著推廣領先科研儀器、實驗技術、提高實驗工作效率的經營方針,本企業重點瞄準數十家國際、國內生命科學領域知名廠商,著急引薦先進靠譜的產品和技術方案。
以市場導向,不斷拓寬合作渠道,以更好滿足生物醫學實驗室檢測、分子生物學研究、細胞學研究、技因組學以及蛋白組學研究等應用對儀器和技術服務的需要。
目前,本公司主營產品包括:伯樂熒光定量PCR儀(cfx 96 touch,cfx 384 touch,cfx connect),梯度PCR儀(T100,S1000,C1000 touch),電穿孔儀(micro pulser,gene pulser xcell),細胞計數儀(TC20),電泳垂直轉印系統(1658033),水平電泳(subcell)蛋白轉印儀(turbo 1704150),凝膠成像儀(geldco go,chemidoc xrs+,chemidoc mp,chemidoc touch),數字PCR儀(QX200),糖分析柱(HPX-87C,HPX-87H,HPX-87P);
賽默飛熒光定量PCR儀(QuantStudio 3,QuantStudio 5,QuantStudio 6,QuantStudio 7 ,7500 fast,stepone plus),梯度PCR儀(2720,9700,miniamp,miniamp plus,SimpliAmp,veriti 96,veriti pro,ProFlex三槽), 細胞計數儀(countess 3,countess 3 FL熒光),核酸蛋白熒光計(qubit 4.0),超微量分光光度計(nanodrop one,nanodrop one C),QuantStudio 3D數字PCR儀;
艾本德小型迷你離心機(minispin,minispin plus),臺式高速離心機(5418,5420,5424,5425,5427,5430,5804,5810型),低速臺式離心機(5702,5702R),臺式高速冷凍離心機(5418R,5424R,5425R,5427R,5430R,5804R,5810R),恒溫混勻儀(thermomixer C),真空濃縮儀(Concentrator plus);
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