Invitrogen TRIZOL說明書/價格（貨號：15596026）
產品名稱：Invitrogen TRIZOL、Trizol Reagent、一步法總RNA提取試劑
品牌：Invitrogen
貨號：15596026 （100ML）和15596018（200ML）
產品優點：可快速簡單地獲得高純度總RNA
特惠價格：1000元/瓶（100ML）；2000元/瓶（200ML）
保存溫度：2-8度
效期：4度保存可2年
用途：TRIZOL試劑純化的RNA可用于PCR、RNA印跡分析、poly（A）+篩選或斑點雜交。純化的DNA和蛋白質分別適用于DNA和蛋白質印跡分析。
Invitrogen TRIZOL說明書：
從細胞中提取總RNA
1） 培養貼壁細胞：不須消化，可直接用Trizol進行消化、裂解，Trizol體積按10cm2/ml比例加入。
2） 懸浮細胞可直接收集、裂解，每1ml Trizol可裂解5×106動物、植物或酵母細胞，或107細菌細胞。
從組織中提取總RNA
1）液氮研磨，組織塊直接放入研體中，加入少量液氮，迅速研磨，待組織變軟，再加少量液氮，
再研磨，如此三次，按50-100mg組織/mlTrizol加入Trizol，轉移入離心管進行第2步操作。
2） 勻漿：組織樣品按50-100mg/mlTrizol 加入Trizol，另外，組織體積不能超過Trizol體積
的10%，否則勻漿效果會不好，用電動勻漿器充分勻漿約需1-2分鐘。
2．細胞或組織加Trizol后，室溫放置5min，使其充分裂解。注：此時可放入-70℃長期保持。
3．12000rpm 離心5min，棄沉淀。
4．按200ul氯仿/ml Trizol加入氯仿，振蕩混勻15分鐘，室溫放置15min。注：禁用漩渦振蕩器，
以免基因組DNA斷裂。
5．4℃12000g離心15min。
6．吸取上層水相，至另一離心管中。
注：1）千萬不要吸取中間界面。
2）若同時提取DNA和蛋白質，則保留下層酚相存于4℃冰箱,若只提RNA，則棄下層酚相。
7．按0.5ml異丙醇/ml Trizol 加入異丙醇混勻，室溫放置5-10min。
8．4℃ 12000g離心10min，棄上清，RNA沉于管底。
9．按1ml 75%乙醇/ml Trizol加入75%乙醇，溫和振蕩離心管，懸浮沉淀。
10．4℃ 8000g離心5min，盡量棄上清。
11．室溫晾干或真空干燥5-10min。 注：RNA樣品不要過于干燥，否則很難溶解。
12．可用50ul H2O，TE buffer或0.5%SDS溶解RNA樣品，55-60℃5-10min。
注：H2O、TE或0.5%SDS均須用DEPC處理并高壓。
12、測O.D值定量DNA濃度。
注：1）此方法提取RNA A260/A280值在1.6-1.8之間。
2） 產率估計：組織標本：（ug RNA/mg組織）1-10ug，培養細胞（ug RNA/106 Cell）：5-15ug。
注：1、組織或細胞量過少，可酌情減少Trizol用量。
2、組織或細胞用量過多，會引起DNA對RNA的污染。
3、高蛋白，脂肪或多糖類組織，肌肉組織或塊狀植物組織等，組織勻漿或液氮研磨
后須4℃ 1200離心10min去掉不溶物，再進行下面操作，若頂層有脂肪物，則
也須去掉。
4、熱天提RNA，帶手套是必須的，手是RNase的主要來源。
5、組織塊用液氮研磨，效果最好，若沒有液氮或電動勻漿器，可用手動勻漿器代替，
此時組織塊不宜過大，且需先用眼科剪將組織絞碎，然后再充分研磨。
