杭州費(fèi)雪推出新品豬流行性腹瀉（PEDV）單克隆抗體

近日，杭州費(fèi)雪推出新品抗豬流行性腹瀉病毒（PEDV）單克隆抗體，這是針對 PEDV 的特異性抗體，在豬流行性腹瀉的診斷、預(yù)防及研究中具有重要作用，以下從多個(gè)方面進(jìn)行詳細(xì)介紹：

一、基本概念
PEDV 是引起豬流行性腹瀉（Porcine Epidemic Diarrhea，PED）的病原體，屬于冠狀病毒科。抗 PEDV 單克隆抗體是通過雜交瘤技術(shù)制備的，能特異性識別 PEDV 表面抗原（如 S 蛋白、N 蛋白等）的單一抗體分子，具有高度特異性和均一性。

二、制備方法
抗原制備：提取 PEDV 的特異性抗原（如 S 蛋白的高免疫原性區(qū)域），或通過基因工程技術(shù)表達(dá)重組抗原（如重組 S1 亞基）。
動物免疫：將抗原免疫小鼠（通常為 Balb/c 小鼠），刺激 B 淋巴細(xì)胞產(chǎn)生特異性抗體。
細(xì)胞融合：取免疫小鼠的脾細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，形成雜交瘤細(xì)胞。
篩選與克隆：通過間接 ELISA 等方法篩選出能穩(wěn)定分泌抗 PEDV 抗體的雜交瘤細(xì)胞，經(jīng)克隆化培養(yǎng)獲得單克隆細(xì)胞株。
抗體生產(chǎn)：通過小鼠腹腔注射或體外培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞，收集腹水或細(xì)胞培養(yǎng)上清，純化獲得單克隆抗體。

三、作用與應(yīng)用
1. 診斷檢測
ELISA 檢測：用于檢測豬血清、糞便等樣本中的 PEDV 抗原或抗體，是 PEDV 感染的主要診斷方法之一。
免疫熒光（IF）與免疫組化（IHC）：通過標(biāo)記抗體（如熒光素、酶標(biāo)），在細(xì)胞或組織中定位 PEDV，輔助病理診斷。
膠體金試紙條：基于單克隆抗體的快速檢測試紙條，可用于豬場現(xiàn)場的 PEDV 抗原初篩。
2. 病毒研究
病毒結(jié)構(gòu)與功能研究：通過單克隆抗體識別 PEDV 的特定抗原表位，分析病毒蛋白的空間結(jié)構(gòu)、抗原性及變異規(guī)律。
中和試驗(yàn)：篩選具有中和活性的單克隆抗體，研究其抑制病毒入侵宿主細(xì)胞的機(jī)制，為疫苗開發(fā)提供靶點(diǎn)。
3. 疫苗開發(fā)與評價(jià)
疫苗效力評估：檢測免疫豬血清中針對 PEDV 的中和抗體水平，評估疫苗誘導(dǎo)的免疫應(yīng)答效果。
被動免疫應(yīng)用：高滴度的中和單克隆抗體可作為 “生物制劑”，用于仔豬的緊急預(yù)防或治療（如口服或注射），尤其適用于 PEDV 爆發(fā)時(shí)的被動保護(hù)。

四、關(guān)鍵特性
特異性：僅識別 PEDV 的特定抗原表位，與其他豬腸道病毒（如豬傳染性胃腸炎病毒 TGEV、豬德爾塔冠狀病毒 PDCoV 等）無交叉反應(yīng)。
中和活性：部分單克隆抗體具有中和病毒的能力，可阻斷 PEDV 與宿主細(xì)胞受體的結(jié)合，抑制病毒感染。
親和力：高親和力的單克隆抗體與抗原結(jié)合更穩(wěn)定，可提高檢測靈敏度（如 ELISA 檢測中最低可檢測到 ng 級抗原）。
亞型覆蓋：由于 PEDV 存在基因變異（如 G1、G2 亞型），優(yōu)質(zhì)單克隆抗體需能覆蓋流行毒株的抗原表位，避免因病毒變異導(dǎo)致檢測或保護(hù)失效。

五、應(yīng)用場景與注意事項(xiàng)
1. 豬場診斷場景
使用場景：當(dāng)豬群出現(xiàn)腹瀉、嘔吐、脫水等癥狀時(shí)，采集糞便或腸組織樣本，用單克隆抗體 ELISA 試劑盒檢測 PEDV 抗原，輔助確診。
注意事項(xiàng)：糞便中的雜質(zhì)可能干擾檢測，需預(yù)處理樣本；若樣本為陽性，需結(jié)合病毒分離或 RT-PCR 進(jìn)一步確認(rèn)。
2. 實(shí)驗(yàn)室研究場景
使用場景：在細(xì)胞水平研究 PEDV 的感染機(jī)制時(shí)，用單克隆抗體標(biāo)記病毒，通過流式細(xì)胞術(shù)或共聚焦顯微鏡觀察病毒與宿主細(xì)胞的相互作用。
注意事項(xiàng)：不同單克隆抗體的表位不同，需根據(jù)研究目的選擇針對 S 蛋白（中和相關(guān)）或 N 蛋白（檢測敏感）的抗體。
3. 疫苗研發(fā)場景
使用場景：評估新型 PEDV 疫苗（如滅活苗、亞單位苗）誘導(dǎo)的中和抗體效價(jià)，篩選高效疫苗株。
注意事項(xiàng)：需參考當(dāng)前豬場流行的 PEDV 毒株亞型，選擇匹配的單克隆抗體進(jìn)行中和試驗(yàn)，避免因毒株變異導(dǎo)致評估偏差。