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          南模生物iPSC體外疾病模型研究平臺上線

          瀏覽次數(shù):2762 發(fā)布日期:2023-1-6  來源:本站 本站原創(chuàng),轉(zhuǎn)載請注明出處

          誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞(iPS)具有類似于胚胎干細(xì)胞的全能性,其能夠分化成特定的細(xì)胞,組織或器官。誘導(dǎo)多能干細(xì)胞 iPS 技術(shù)具有巨大的潛在應(yīng)用價值,可以用于干細(xì)胞治療研究,構(gòu)建疾病模型,發(fā)現(xiàn)新的治療靶點或篩選新的藥物。近日南模生物推出的 iPS 疾病研究模型平臺擁有多年培養(yǎng)干細(xì)胞的經(jīng)驗和干細(xì)胞基因編輯技術(shù),已建立穩(wěn)定的iPS誘導(dǎo)系統(tǒng),可以提供高效的疾病研究模型。
           

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          1. iPSC 體外疾病模型的優(yōu)勢

          1. 體外誘導(dǎo)的 iPSC 細(xì)胞可無限擴增和定向分化,有利于替代較難獲得的原代細(xì)胞系。

          2. 患者體內(nèi)誘導(dǎo)出來的 iPSC 細(xì)胞,分化形成的類器官,有利于大規(guī)模的進(jìn)行藥物篩選。

          3. iPSC 細(xì)胞在體外更容易進(jìn)行基因編輯,誘導(dǎo)分化細(xì)胞可以高效模擬疾病的治療。

          2. iPSC 體外疾病模型服務(wù)內(nèi)容及交付周期
           

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          3. iPSC 體外疾病模型服務(wù)案例

          3.1外周血單核細(xì)胞重編程為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPS)

          通過密度梯度離心,將外周血中的單個核細(xì)胞分離出來。單個核細(xì)胞經(jīng)體外擴增后,電轉(zhuǎn)重編程質(zhì)粒 OCT3/4,SOX2,KLF4,L-MYC,LIN28。電轉(zhuǎn)第七天可見細(xì)胞貼壁,12-18 天 iPS 克隆逐漸形成,qPCR 驗證 iPS細(xì)胞相關(guān)基因均有表達(dá)。
           

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          注:A圖為紅系祖細(xì)胞重編程打靶day0;B圖為day7,細(xì)胞開始貼壁;C圖為day12,iPS克隆開始出現(xiàn);D圖為day18,iPS克隆長成,邊緣清晰,細(xì)胞致密。

           

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          qPCR 驗證iPS細(xì)胞相關(guān)基因均有表達(dá)

           

           

          3.2 iPS細(xì)胞和人胚胎干細(xì)胞的基因編輯

          敲除示例:在基因CISH第三個外顯子內(nèi)選取sgRNA進(jìn)行基因編輯,移碼突變造成CISH基因的敲除。
           

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          hiPSC-CISH-KO編輯方案

           

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          hiPSC-CISH-KO測序驗證

           

          敲入示例:在人iPS細(xì)胞 NANOG基因后插入TdTomato熒光蛋白。
           

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          iPS-NANOG-2A-tdTomato編輯方案

           

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          iPS-NANOG-2A-tdTomato熒光表達(dá)驗證

           

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