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浸泡型透明化技術是將樣品浸泡在高折射率溶液中利用滲透壓使組織逐漸透明化，該方法不去除脂質，利用高折射率溶液替換組織內外的液體，以平衡折射率，浸泡型透明化方法常適用于較小樣本的透明化處理。Clear^T是基于甲酰胺的浸泡型透明化方法，該方法透明速度快，成像效果好，但會使組織略微膨脹，且會使樣本熒光信號淬滅。PEG可以穩定蛋白質構象，繼而發展了可保留熒光蛋白的Clear^T2的透明化技術，但該方法透明度比clear^T低，透明化能力受限。SeeDB技術以果糖和硫代甘油為主要成分。能在幾天內將樣本透明化，且體積變化小，并可以與親脂性染料兼容。但該方法因果糖黏度大導致在組織內的滲透性較低。由于SeeDB黏度極高，在SeeDB基礎上衍生了FRUIT透明化方法，該方法選擇尿素作為試劑中另一成分，降低了果糖黏度，大大提高試劑流動性和滲透性，加速了試劑在組織中的擴散速率。雖然浸泡型透明化操作比較簡單方便，但浸泡型透明化方法不能去除脂質，因此通過該方法處理的樣本透明度有限。
 

3. 水凝膠組織透明化方法

去垢劑可以高效的去除樣本中的脂類物質，但是高濃度的去垢劑處理樣本可能會使樣本發生形變。通過將樣本包埋在水凝膠中，使水凝膠與樣本中的蛋白質和核酸分子形成共價連接便可固定和保護細胞結構，再將樣本置于透明化試劑中即可避免樣本發生這種形變。CLARITY透明化方法利用凝膠包埋樣本，并利用電場力去除樣本的脂質從而使樣本快速透明。SHIELD透明化方法通過環氧化合物P3PE固定組織實現蛋白的保護，之后使用SDS進行被動或主動除脂。

油性透明化方法透明的樣本透明度高，速度快，能適用于多種組織和器官。但是油性方法所使用的試劑大多毒性較強，并且容易淬滅內源性熒光蛋白的信號，不能和細胞膜上親脂染料相兼容，樣本會有明顯收縮，組織或器官內部精確三維結構丟失。水性透明化方法雖然可以部分解決熒光蛋白易淬滅的問題，但是也存在透明時間長，透明能力低的缺點。水凝膠透明化方法操作過程復雜，且需要一定的設備。

 

面對種類如此繁多的透明化方法，我們該如何進行選擇呢？

锘海研發的透明化試劑盒依托測樣服務中積累到的豐富而寶貴的經驗，對各種透明化方法進行測試和比較后對試劑配方進行了精心優化，使其在組織熒光保護、樣本形態維持、降低自發熒光等方面表現出非常優異的性能。能夠輕松實現小鼠腦、心、肝、脾、肺、腎、胃、腸、睪丸、淋巴、胎盤、卵巢等各類組織器官的透明化，適用范圍廣、操作簡便、速度快、效率高，是廣大科研工作者的不二之選。

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