普瑞麥迪誠邀大家試用最新血清抗體檢測分析系統

2020年至今，COVID-19席卷全球，目前已造成世界數千萬人感染，數百萬人失去生命。新冠病毒致病機制是通過病毒表面的刺突蛋白(S蛋白)與肺部上皮細胞表面ACE2蛋白質結合，隨后，病毒會趁機侵入人體細胞。人體內也會啟動相應的免疫程序，產生針對新冠病毒S蛋白的抗體稱之中和性抗體。它們可以結合病毒表面S蛋白，阻斷S蛋白與ACE2的結合，從而阻斷病毒進入細胞。故能夠在血清中檢測中和性抗體的親和力顯得尤為重要以及康復者或者疫苗注射者血清（漿）內中性抗體的結合力顯得尤為重要。

1. 首先它是發揮抗病毒效應的主要力量；

2. 目前我國對重癥病人和危重癥病人采取康復者血漿治療；

3. 傳統標準的VNTs，亦或是基于Elisa的sVNTs，都不能提供關于是通過低濃度弱結合親和力的NAbs還是低濃度緊密結合親和力的NAbs來實現病毒中和的信息；

4. 市面上主流的分子互作系統都是基于表面結合的原理，而我們知道，在體內的結合并非發生在結合表面上，故這些方法不能完全反映出真實的結合狀態；

英國劍橋大學科學家團隊經過不懈努力，在Fluidity One-W微流控擴散檢測儀后,又推出了一款專門針對病毒檢測的儀器(Fluidity One-W Serum),它可以在血清中（50ul）直接檢測病毒抗體濃度及結合強弱，該方法不需要固定，能夠在接近生命體的環境中檢測，得到的數據也就更貼近真實值。
 

優勢

1. 在溶液中檢測，無需表面固定，無非特異性結合

2. 在更接近天然的狀態下分析相互作用

3. 直接在最小稀釋血清中進行抗體親和力分析和濃度測定，以進行全面的免疫反應評估

4. 簡單易操作

5. 可以迅速測定蛋白是否降解

6. 可以進行化學計量學測定，可以測定分子間結合比例

7. 一次性芯片減少交叉污染

應用案例
案例1

在新冠疫情爆發前對照血清中測量了重組ACE2和S1結合的KD值。隨著S1濃度的增加，有效流體動力學半徑（Rh）也增加了，說明了蛋白質復合物ACE2–S1的有效結合（圖B）。同樣，在對照血清測量了單克隆Nab和S1結合的KD值（圖D）。將NAb添加到濃度為10 nM的熒光標記的ACE2和濃度為50 nM的S1的混合物中會導致Rh減少，因為NAb1與S1結合，從而從復合物中置換出ACE2。通過ACE2-S1和Nab-S1親和力，并基于競爭結合模型預測抑制等溫線(圖D紅色)，這與實驗得到的抑制等溫線非常一致（圖D黑色）。之后還將該方法應用于兩個新冠呈陽性的病人的血清中。

該款儀器的誕生實現了溶液中受體結合競爭分析，可以測定多克隆血清抗體的有效解離常數(KD)及其濃度；為選擇恢復期血漿治療供體提供鑒定；為治療性抗體開發和疫苗開發的候選先導物提供鑒定。
案例2

使用微流體抗體親和譜分析（MAAP），確定了42名血清陽性患者血漿樣本中抗SARS-CoV-2抗體的總親和力和濃度，其中23名經PCR測試確認為SARS-CoV2陽性。研究發現，盡管具有相似的抗體濃度，抗RBD抗體的解離常數（Kd）卻超過了兩個數量級，從80 pM到25 nM。該款血清抗體檢測儀（Fluidity One-W Serum）測定結果與基于細胞的中和測定法非常吻合。(如上圖)。最后確定了針對SARS-CoV-2的免疫反應具有識別其他冠狀病毒的RBD表位的能力，這表明活化的記憶B細胞可能會產生中和的抗體，即使由其他未來的SARSCoV-2變體觸發也是如此。抗體濃度和親和力之間的關系可能會影響血漿置換，并靶向適當的表位以進行有效中和。

從全文結果來看只有具有非常高的Kd值的患者才應被視為血漿置換的獻血者，這是常規方法無法充分獲取的。故血漿總免疫球蛋白對SARS-CoV-2的親和力可作為評價SARS-CoV-2免疫應答質量的指標，該款血清抗體檢測儀（Fluidity One-W Serum）有助于選擇最有效的樣本進行治療性血漿置換。

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