CRISPR/Cas9基因靶向修飾技術培訓班邀請函

10月14日

9:30-20:00

培訓報到

2008年博士畢業于中國科學院上海生命科學研究院，從事腫瘤干細胞，細胞衰老，腫瘤轉移等細胞作用網絡和通路的研究，并作為骨干研究人員參加了973計劃項目、國家自然科學基金重點項目、在香港中文大學做為作為Postdoc和Research fellow，從事研究工作。先后Nature Genetics，cell research、PLOS one等期刊發表論文十余篇。

10月15日

9:00-11:30

理論講解：

1.CRISPR/Cas9靶向基因改造技術簡介（三大基因組編輯工具）

2.CRISPR/Cas9系統作用原理

3.guide RNA序列設計（特異性分析，效率驗證，不同物種sgRNA設計）

實驗操作：

1.CRISPR/Cas9基因表達載體構建

2.連接，轉化

13:00-17:00

理論講解：

1.基因轉染技術（脂質體轉染，電轉，病毒轉導，顯微注射等）

2.Crispr/Cas9轉染策略（植物，動物，原核生物）

3.CRISPR/Cas9病毒系統選擇

實驗操作：CRISPR/Cas9轉染靶細胞

10月16日

9:00-11:30

理論講解：

1.基因敲除小鼠模型構建策略

2.Crispr/Cas9與siRNA、shRNA

3.陽性克隆篩選策略選擇

實驗操作：

1.CRISPR/Cas9轉然后基因組DNA提取

2.靶基因修飾位點PCR擴增及鑒定（引物設計策略）

13:00-17:00

理論講解：

1.多靶點sgRNA載體構建策略

2.Crispr/Cas9系統應用實例分析

1)哺乳動物

2)植物

3)細菌，真菌

實驗操作：

1.SDS-PAGE膠制備，瓊脂糖凝膠電泳

2.T7E1法檢測Crispr/Cas9系統sgRNA效率。