從Tau蛋白入手探尋阿爾茨海默病更佳的動物模型構建路徑

阿爾茨海默病（AD）的兩大核心病理特征，是腦內β-淀粉樣蛋白（Aβ）沉積形成的神經炎性斑塊，以及神經元內Tau蛋白異常磷酸化后聚集形成的神經纖維纏結（NFTs）^[1]。過去數年，AD動物模型與藥物研發大多聚焦于Aβ沉積。然而，隨著多項Aβ靶向療法的臨床試驗遭遇療效瓶頸，Tau蛋白作為干預靶點的價值日益凸顯，能夠精準模擬人類Tau病理的動物模型也因此成為迫切需求。

為滿足這一需求，賽業生物構建了B6-hTau人源化小鼠（產品編號：C001410）。該模型引入完整的人源Tau蛋白編碼基因MAPT（含內含子和3'UTR），實現了人類Tau蛋白多種剪接異構體（3R和4R）的生理性表達，顯著優于傳統模型。此外，賽業還開發了攜帶P301L（產品編號：C001835）和P301S（產品編號：C001836）病理突變的Tau人源化模型，該系列模型可重現Tau蛋白磷酸化聚集、神經元結構紊亂及記憶功能障礙等關鍵病理，為靶向Tau的抗體、小核酸等療法提供了精準可靠的臨床前研究平臺。

2024年AD藥物研發總體現狀^[1]

AD藥物研發：從Aβ到多元化靶點
近年來，AD藥物研發領域機遇與挑戰并存。以Lecanemab和Donanemab為代表的Aβ靶向療法，雖在延緩認知惡化方面取得了一定進展，但部分藥物因療效或爭議問題研發中止，也凸顯了Aβ靶點的局限性。因此，研發重心正從單一Aβ靶點轉向更廣泛的病理機制，尤其是Tau蛋白。例如，渤健已調整策略，聚焦于Tau靶向的ASO和小分子療法；基因泰克與Sangamo Therapeutics合作探索Tau基因療法；強生開發的Tau靶向單抗和主動免疫療法也獲得了FDA的快速通道資格^[2-8]。這些行業動向標志著AD治療正邁向多元化、多模態干預，也凸顯了開發精準Tau病理動物模型的緊迫性。

AD的多種致病性假說^[9]

Tau病理：從功能失調到神經退行
Tau蛋白由MAPT基因編碼，富集于神經元軸突，通過結合微管來維持其穩定性，對神經元形態、軸突運輸和信號傳導至關重要^[9–10]。人類的MAPT基因通過復雜的可變剪接，能夠產生六種主要的Tau蛋白異構體。其中，由第10號外顯子（exon 10）的選擇性剪接所決定的3R和4R兩種形式，對多種神經退行性疾病的病理形成至關重要。這里的“R”代表微管結合域的重復數目。當第10號外顯子被缺失時，產生的Tau蛋白具有3個微管結合域，即為3R-Tau；而當它被保留時，產生的Tau蛋白則擁有4個微管結合域，即為4R-Tau。不同疾病類型通常伴隨著3R與4R-Tau比例的特異性失調^[11]。根據“Tau假說”，Tau蛋白的異常是驅動神經退行性疾病發展的關鍵。在病理狀態下，Tau蛋白會發生過度磷酸化，導致它從微管上脫落，從而失去對微管的穩定作用，最終引發神經元損傷。此外，這些過度磷酸化的Tau蛋白會進一步聚集，形成不溶性的神經纖維纏結（NFTs）。3R和4R-Tau均可參與這一過程。這些纏結會破壞細胞內的運輸系統，阻礙神經信號的正常傳遞，最終導致神經元功能障礙和死亡^[12]。

Tau蛋白與多種因素協同驅動AD及Tau蛋白病發生和發展^[13]

特定MAPT基因突變能顯著加速這一病理進程：
（1）P301S突變：降低Tau蛋白促進微管組裝的能力，使其更傾向于形成病理性聚集。
（2）P301L突變：位于高度保守區域，能加速“成對螺旋絲”的形成，同時削弱Tau與微管的相互作用，從而促進NFTs生成。

此外，異常磷酸化的Tau蛋白還能通過“種子效應”在腦內擴散，加劇疾病進程。P301L和P301S突變不僅是家族性額顳葉癡呆（FTD）的主要病因，也為理解散發性AD的病理提供了重要線索^[14]。目前，針對Tau蛋白的治療策略主要包括抑制其過度磷酸化、阻止其聚集，以及利用抗體或小核酸藥物促進其清除^[12-15]。

靶向Tau及相關通路的療法類型^[12]

賽業生物Tau人源化模型：精準復現人類AD病理
為滿足日益增長的Tau靶向藥物研發需求，賽業生物開發了Tau人源化小鼠模型系列。

其中，基礎品系B6-hTau人源化小鼠（產品編號：C001410），通過基因編輯技術將小鼠Mapt基因完整替換為人源MAPT基因（包含內含子和3'UTR），以確保人源Tau蛋白在小鼠體內實現生理性表達與剪接。該模型能表達多種人類Tau蛋白剪接異構體，而這在野生型小鼠中無法實現。該特性使B6-hTau小鼠在解析AD中3R與4R Tau異構體的動態表達、組織分布及差異性積累等關鍵病理環節時，相比傳統CDS人源化模型具有顯著優勢，提供了不可替代的研究平臺。

B6-hTau小鼠成功表達人源Tau蛋白，并可檢測到多種不同的人類Tau蛋白異構體

以此模型為基礎，攜帶人源致病突變P301L（產品編號：C001835）和P301S（產品編號：C001836）的人源化疾病模型，進一步精準復現了人類AD的Tau蛋白聚集病理和行為學缺陷。以下為部分代表性驗證數據。

●行為學檢測：情景記憶功能損傷（6月齡&9月齡）
在新物體識別實驗中，B6-hTau*P301L小鼠和B6-hTau*P301S小鼠對新舊物體沒有表現出顯著偏好，表明其情景記憶功能存在明顯損傷。作為對比，野生型（WT）小鼠和B6-hTau小鼠則表現出正常的偏好行為。

B6-hTau*P301L小鼠和B6-hTau*P301S小鼠存在情景記憶功能嚴重損傷

●蛋白表達：人源Tau蛋白表達（9月齡）
在B6-hTau小鼠、B6-hTau*P301L和B6-hTau*P301S小鼠海馬組織中，均成功檢測到人源Tau蛋白（HT7）表達。同時，B6-hTau*P301L和B6-hTau*P301S小鼠還伴有神經元結構紊亂的病理特征，而B6-hTau和野生型小鼠則未見異常。

B6-hTau小鼠、B6-hTau*P301L小鼠和B6-hTau*P301S小鼠海馬中成功表達人源Tau蛋白

●腦部病理：磷酸化Tau蛋白積聚（9月齡）
在B6-hTau*P301L小鼠和B6-hTau*P301S小鼠海馬組織中，可檢測到磷酸化Tau蛋白（AT8）的顯著積聚，并伴隨神經元結構紊亂，而野生型小鼠和B6-hTau小鼠均未出現此類病理。

B6-hTau*P301L小鼠和B6-hTau*P301S小鼠海馬中的磷酸化Tau蛋白積聚

●藥效驗證：人源MAPT靶向小干擾RNA（siRNA）
B6-hTau人源化小鼠已被廣泛用于驗證靶向MAPT的siRNA藥物藥效。通過腦室內注射siRNA藥物，能有效且顯著地降低小鼠多個腦區人源MAPT mRNA的表達。

B6-hTau小鼠用于不同人源Tau靶向siRNA的臨床前藥效評估

模型總結
綜上所述，賽業生物的Tau人源化小鼠模型系列精準再現了阿爾茨海默�。ˋD）的關鍵基因型和表型特征。B6-hTau小鼠（產品編號：C001410）可用于研究人源Tau蛋白的生理功能，并作為評估疾病相關Tau突變效應的基礎參照模型，特別適用于探索阿爾茨海默�。ˋD）中Tau剪接異構體——包括3R和4R形式——在疾病機制中的具體作用及其差異性積累。而B6-hTau*P301L小鼠（產品編號：C001835）和B6-hTau*P301S小鼠（產品編號：C001836）不僅表達人源Tau蛋白，更表現出顯著的磷酸化Tau蛋白積聚和情景記憶損傷等病理特征，成功模擬了AD患者的認知功能缺陷。這些模型可廣泛應用于Tau病理機制研究、靶向療法評估及藥物篩選，是推動AD新藥研發的“加速器”，我們期待這一系列模型能為攻克阿爾茨海默病帶來突破性進展。