蠕動泵分液器在牙膏微生物檢驗中的應(yīng)用

方案摘要：牙膏微生物學檢驗的基本要求以及適用于牙膏樣品的采集、保存及供檢樣品制備。
 
 
方案詳情：

• 實驗內(nèi)容

1、牙膏樣品的采集、保存及供檢樣品制備。
 
 
二、實驗儀器和試劑準備
①天平：0~200 g，精確至0.1 g。
②高壓滅菌器。
③振蕩器 spp-sk-500
④三角瓶：250 mL、150 mL。
⑤玻璃珠
⑥無菌吸管：1 mL（具0.01 mL刻度）FDT-SP01001
⑦無菌吸管：10 mL（具0.1 mL刻度）FDT-SP01010
⑧手動移液器：fluidot  1 mL  MSP1K
⑨電動移液器：pipetty  1 mL  MSIC01-02-1000
⑩吸頭：1.5mL   FDT-1500-1-TSF
⑪蠕動泵分液器：fluidot  600D
⑫均質(zhì)器: samprep
⑬滅菌均質(zhì)袋 fluidot  520110
⑭SCDLP液體培養(yǎng)基
     成分：酪蛋白胨                   17 g
           大豆蛋白胨                  3 g
           氯化鈉                      5 g
           磷酸氫二鉀                2.5 g
           葡萄糖                    2.5 g
           卵磷脂                      1 g
           吐溫80                      7 g
           蒸餾水                 1000 mL
制法：先將卵磷脂在少量蒸餾水中加熱溶解后，再與其他成分混合，加熱溶解，調(diào)pH為7.2~7.3分裝，每瓶90 mL，121℃高壓滅菌20 min。注意振蕩，使沉淀于底層的吐溫80充分混合，冷卻至25℃左右使用。
注：如無酪蛋白胨和大豆蛋白胨，也可用多胨代替。
 
 
 
三、樣品的采集及注意事項
① 所采集的樣品，應(yīng)具有代表性，一般視每批牙膏規(guī)格大小，隨機抽取相應(yīng)數(shù)量的包裝單位。檢驗時，應(yīng)從不少于2個包裝單位的樣品中共取10 g。包裝量小于20 g的樣品，采樣時可適當增加樣品包裝數(shù)量。
②供檢樣品，應(yīng)嚴格保持原有的包裝狀態(tài)。容器不應(yīng)有破裂，在檢驗前不得打開，防止樣品被污染。
③接到樣品后，應(yīng)立即登記，編寫檢驗序號，并按檢驗要求盡快檢驗。如不能及時檢驗，樣品應(yīng)置于陰涼干燥處，不要冷藏或冷凍。
④若只有一個樣品而同時需做多種分析，如微生物、毒理、化學等，則宜先取出部分樣品做微生物檢驗，再將剩余樣品做其他分析。
⑤在檢驗過程中，從打開包裝到全部檢驗操作結(jié)束，均須防止微生物的再污染和擴散，所用器皿及材料均應(yīng)事先滅菌，全部操作應(yīng)在符合生物安全要求的實驗室中進行。
 
四、供檢樣品的制備
天平稱取10 g，加到裝有玻璃珠及90 mL SCDLP液體培養(yǎng)基（或經(jīng)過驗證等效或優(yōu)于SCDLP的稀釋液）三角瓶中，通過振蕩器 spp-sk-500充分振蕩混勻，作為1:10的檢液。
使用samprep均質(zhì)器時，則采用滅菌均質(zhì)袋，稱10 g樣品加入90 mL SCDLP液體培養(yǎng)基（或經(jīng)過驗證等效或優(yōu)于SCDLP的稀釋液），均質(zhì)1 min~2 min，充分混勻后，作為1:10的檢液。