核酸絕對定量之數(shù)字PCR技術的實驗流程與應用

數(shù)字PCR技術
數(shù)字PCR技術是將含有核酸分子的反應體系分成成千上萬個納升級的微滴，其中每個微滴或不含待檢核酸靶分子，或者含有一個至數(shù)個待檢核酸靶分子。經(jīng)PCR擴增后，對每個微滴進行檢測，根據(jù)泊松分布原理及陽性微滴的個數(shù)與比例即可得出靶分子的起始拷貝數(shù)或濃度。
 

數(shù)字PCR是一個全新的絕對定量方式，與傳統(tǒng)PCR定量PCR相比：其結果的精確度、準確性和靈敏度更佳，結果不依賴Ct值，直接給出靶序列濃度，實現(xiàn)真正意義上的絕對定量。

數(shù)字PCR應用

• 定量癌癥標志物；
• 區(qū)分基因組變異；
• 研究病毒載量；
• NGS結果驗證；
• 基因表達分析；
• 基因拷貝數(shù)檢測；
• ......

平臺優(yōu)勢

• 服務周期短：1.5-2h檢測時長
• 可多重檢測 ：6色熒光通道
• 靈敏度高 ：＞90%液滴有效率、樣本有效利用率可達95%
• 精確度高 ：一步法RT-PCR試劑，提高RNA樣本檢測精確度
• 試劑開放 ：兼容客戶試劑體系，增大特殊檢測成功率

實驗流程

結果示例

樣品信息
DNA樣品：純度OD260/280 比值為 1.6-1.8，濃度≥10 ng/μl，體積≥20μl。
RNA樣品：純度OD260/280 比值為 1.8-2.0，濃度≥20 ng/μl，體積≥20μl。需要干冰運輸。

應用案例
數(shù)字PCR儀在食品和藥物檢測中的應用（上）

杭州沃森生物技術有限公司應用新一代Sniper DQ-24全自動數(shù)字PCR,提供感染性疾病研究、遺傳疾病研究、腫瘤生物標志物研究、NGS文庫定量、基因表達分析、環(huán)境監(jiān)測和食品安全檢測等服務。同時提供免費Demo實驗，歡迎參觀及預約服務。