紫外分光光度法測中草藥中鐵的含量的應用方案

摘 要: 對白芍、黨參、白術、茵陳、天冬、枸杞子、當歸、菟絲子、金銀花、桔梗中微量元素鐵的含量進行了測定，為進一步研究其藥理作用提供基礎。中草藥消化后配制成溶液，用鄰二氮菲作顯色劑，使用紫外分光光度計在510nm處測定各樣品的吸光度（A），求出樣品中微量元素鐵的含量。結果顯示，當歸和金銀花中鐵的含量較豐富，分別為（135.3678±0.1111）μg/g和（125.9364±0.1599）μg/g;桔梗含鐵量最少，為（3.5109±0.1599）μg/g，10種中草藥中鐵含量有顯著性差異（P<0.05）。結果為使用中草藥治療系統疾病提供了可靠數據，10種中草藥在用量范圍內Fe含量適合人體每天正常攝入量。

      中草藥是我國寶貴的醫學財富，研究中草藥中的微量元素及其含量，對于認清其藥學機理，進一步開發應用領域都有重要的現實意義。許多研究表明，微量元素可以直接參與或與其它成分協同作用而影響藥效。鐵是人體必需的微量元素之一，其在藥物代謝方面起著重要的作用 。鐵不僅參與血紅蛋白的合成，又是肌紅蛋白、細胞色素、過氧化氫酶、過氧化物酶等的組成部分。如果缺鐵會造成上述酶或蛋白質合成不足，繼而影響氧和二氧化碳的運輸以及氧的利用。因此，鐵和生命呼吸與細胞的生物氧化過程密切相關，具有重要的生理意義。為了探討中草藥中鐵與呼吸系統疾病之間的關系，本文選取10種治療呼吸系統疾病的中草藥采用了分光光度法測定其中鐵的含量。

1實驗部分
1.1儀器
紫外分光光度計。
1.2試劑
濃HCl，濃HNO3 ；HClO4；NH 4 Fe（SO4）2・12H2O，鹽酸羥胺，鄰二氮菲，NaAc，均為優級純。

1.3溶液的配制
鐵標溶液:10mg/mL:準確稱取0.8634g十二水硫酸鐵銨，置于燒杯中，用30mL2mol/L HCl溶液溶解后轉入1L容量瓶中，用去離子水稀釋至刻度，搖勻，然后從中吸取50mL該溶液于500mL容量瓶中，加20mL2mol/LHCl溶液，用去離子水稀釋至刻度，搖勻。10%鹽酸羥胺水溶液（臨用時配制）。
0.15%鄰二氮菲水溶液（臨用時配制，應用少許鹽酸溶解，再用去離子水稀釋）。1mol/L NaAc水溶液。

1.4樣品及樣品處理
1.4.1樣品 
白芍、黨參、白術、茵陳、天冬、枸杞子、當歸、菟絲子、金銀花、桔梗，均為市售。
1.4.2樣品處理
取烘干后藥品搗碎，每一樣品稱取三份，每份1.0000g于50mL錐形瓶中，加10mL濃HNO3，封口放置過夜。次日加入10mL濃HNO3，5mLHClO4，于電熱板上緩慢加熱，當剩下2mL左右時再分別加入20mL濃HNO3。5mLHClO4，繼續消化至溶液呈無色透明近約剩1mL時，停止加熱，用去離子水洗滌杯壁多次，洗液和殘液合并，定容于50mL容量瓶中。

1.5鐵標準曲線的繪制
準確吸取10mg/mL鐵標液，0.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0、12.0mL依次加入到50mL容量瓶中，再分別加入1mL10%鹽酸羥胺溶液、5mL1mol/L NaAc溶液及2mL0.15%鄰二氮菲溶液。每加入一種試劑后都要搖勻，用去離子水稀釋至刻度，靜置10min后，以0.0鐵標溶液為空白，在510nm波長下測量上述各溶液吸光度，然后制作標準曲線。

1.6 樣品含量測定
將處理后樣品分別取5mL于50mL容量瓶中，依次加入10%鹽酸羥胺1mL，1mol/L NaAc5mL溶液及0.15%鄰二氮菲2mL。每加入一種試劑后都要搖勻。按儀器工作條件測定各樣品吸光度。

2結果與討論
2.1結果
10種中草藥鐵的含量測量結果表明，不同中草藥中鐵的含量有顯著差異，當歸和金銀花中鐵含量較高，桔梗鐵含量最低。產生這種差異的原因，作者認為是各種中草藥生長環境和形態結構不同造成的。

2.2討論
實驗選取的這10種中草藥都是治療呼吸系統疾病的常用藥物。當歸其性甘、辛、苦、溫，歸肝、心、脾、肺經，具有補血調經、活血止痛、托毒生肌、止咳平喘等功效，當歸臨床上用于治療多種疾病，如:血虛面色萎黃、唇甲蒼白、頭昏目眩、月經不調、經少經閉、痛經、月經過多、崩漏下血及胃腸出血、跌打損傷、瘀血腫痛、頭痛、手術后瘀血疼痛、痹痛麻木、中風半身不遂、瘡瘍癰疽及肌膚痛癢、咳喘、心悸怔忡、失眠健忘、脈結代、黃疸等。金銀花為忍冬科半常綠纏繞灌木忍冬或紅腺忍冬及其它同屬植物的花蕾，或初開的花，具有清熱解毒、涼散風熱之功效，主要用于外感熱病和熱毒癰腫。
鐵是人體必需的微量金屬元素，也是人體內含量最高的微量元素，正常成年男性體內含鐵量為3～5g，女性稍低。其中65%～80%存在于血紅蛋白中，20%～30%以鐵蛋白或含鐵血黃素形式存在于肝、脾及骨髓中，用于合成血紅蛋白，4%構成肌紅蛋白，極微量構成含鐵酶（細胞色素系統、細胞內過氧化物酶和過氧化物氫酶等），是血紅蛋白、肌紅蛋白、紅細胞色素及其它酶系的主要成分，幫助氧的運輸，促進脂肪氧化。另外，鐵還參與黃嘌呤氧化酶活性中心的構成，催化自由基反應，損傷脫氧核糖核酸（DNA）、蛋白質等大分子。在人體內各元素平衡及相互作用中占有重要地位。鐵在生物氧化和呼吸過程中起重要作用，并參與氧和二氧化碳的轉運。
人和動物口服或吸入過量鐵對人體都會引起毒性及異常變化，但在某些情況下鐵對人體有益。鐵在人體的正常值為:全血為0.5mg/mL，血清為0.065～0.175mg/mL。鐵在體內與感染的關系，多數學者認為許多有關酶的成分、淋巴細胞轉化率、吞噬細胞移動、抑制因子、中性粒細胞吞噬功能等均與鐵水平有關。缺鐵時，影響機體血紅蛋白的合成，形成缺鐵性貧血，進而使脫氧核糖核酸（DNA）合成減少，抗體的產生受到抑制，淋巴細胞對抗原的反應能力降低，易發生感染。通過對32例小兒支氣管肺炎的治療研究發現小兒支氣管肺炎的兒童體內鐵含量明顯低于健康兒童（P<0.01），因此缺鐵時更易感染小兒支氣管肺炎。
鐵吸收、周轉、利用和代謝都受到生物體的嚴格控制，鐵缺乏固然對健康不利，但鐵過量對機體造成的危害往往更嚴重。因此，無論是在日常生活中，還是在臨床醫學上，都應科學地把握鐵的攝入量。測定結果顯示，這10種中草藥在用量范圍內均小于人體每天正常攝入值。因此，利用這10種中草藥治療小兒支氣管肺炎，不會因鐵過量而導致其它更嚴重的疾病。本實驗通過對10種中草藥中鐵含量的測定，為臨床用藥提供了基礎。