C280成像系統在EtBr、SYBR Green、考馬斯藍和銀染蛋白膠成像中的應用
Azure Biosystems c系列數字成像系列產品是行業領先產品，用戶界面友好、應用靈活。 在本應用中，我們展示了一些可以在c系列家族最新成員Azure Biosystems c280上完成的新應用。
簡介
Azure Biosystems c280數字成像儀是數字化學發光成像的理想切入點。 然而，其優點并不止于此，具有雙波長302nm和365nm紫外的c280用于溴化乙錠（EtBr）DNA凝膠的成像；使用EPI藍光LED 用于“安全”DNA染料SYBR Green等的成像；RGB混合白光光源用于考馬斯藍，銀染蛋白膠等的成像。
C280的用戶界面友好，自動聚焦，軟件控制光源和濾光片選擇使成像變得更容易。
材料和方法
DNA凝膠
通過凝膠電泳分離進行系列稀釋的東升生物技術公司100bp Ladder Plus。使用預先EtBr染色的凝膠或用SYBR Green后染色的凝膠，使用紫外透射儀（302nm）或EPI藍光在Azure Biosystems c280數字成像儀上采集圖像。
考馬斯亮藍染色的凝膠
一系列純化的轉鐵蛋白進行稀釋，使用4-15%的Tris-Glycine凝膠進行稀釋，考馬斯亮藍染料進行染色，使用AzureC280 RGB混合光源進行成像采集成像。
化學發光+可見彩色Marker成像
純化的轉鐵蛋白經過一系列的稀釋從500pg-61fg，使用SDS-PAGE電泳進行分離，蛋白分離后使用Azure轉印buffer轉印到低熒光背景膜上，進行封閉，孵育 chicken-anti-transferrin 的一抗，漂洗，孵育goat-anti-chicken HRP 的二抗；所有的稀釋液使用Azure Chemi Blot Blocking
Buffer.使用Azure Radiance chemiluminescent 底物液，成像使用C280化學發光模塊進行采集并與彩色marker進行整合。
結果和討論
在這個應用中，Azure Biosystems c280數字成像儀應用更靈活。 DNA凝膠結果顯示在圖1中 - A）EB使用紫外302nm成像，B）SYBR Green染色的類似凝膠用Epi Blue成像。
圖1.DNA凝膠使用EB和SYBR染料進行染色A）EB染色的凝膠使用UV302nm進行成像 B）SYBR Green染色的DNA凝膠，使用RGB混合白光光源進行成像，圖中方框展示的是78pg的濃度
圖2顯示了代表性考馬斯藍染色的蛋白質凝膠。 Azure Biosystems c280數字成像儀具有高分辨率CCD，自動圖像采集協議。 可見成像模式直接獲取彩色圖像，對比更明顯。
圖2：考馬斯亮藍染色的凝膠，純化的轉鐵蛋白經過一系列的稀釋從5000ng-5ng，使用4-15%的Tris-Gly凝膠進行分離，使用考馬斯亮藍染液進行染色，方框展示的是10ng的蛋白。
最后，圖3顯示了數字化學發光圖像與可見光彩色marker整合圖，允許精確的分子量分析。
圖3.化學發光-可見光整合成像，純化的轉鐵蛋白經過500pg-61pg一系列稀釋，使用化學發光 western blot進行檢測，C280化學發光和可見彩色Marker同時成像進行整合。
言之，Azure Biosystems公司的c280是多功能多應用成像儀，可以簡化大量常用的實驗室技術。 以其經濟的價格，和易用性，C280化學發光成像系統是您實驗室理想選擇。
