離子交換法(IEX)用于生物治療性藥物電荷變異體分析

Robert Birdsall，Thomas Wheat，and Weibin Chen

沃特世公司（美國馬薩諸塞州米爾福德市）

應(yīng)用優(yōu)勢
■ 通過自動化分析技術(shù)提高工作效率
■ 穩(wěn)健的方法開發(fā)為生物治療性藥物電荷變異體的確證和定量帶來一致且重現(xiàn)性良好的結(jié)果
■ 無需制備額外緩沖液，簡化方法開發(fā)過程并提高方法重現(xiàn)性

沃特世解決方案
UNIFI® 生物制藥平臺解決方案
ACQUITY UPLC® H-Class系統(tǒng)
ACQUITY UPLC可變波長紫外（TUV）檢測器
Protein-Pak^TM Hi Res SP SCX色譜柱
UNIFI科學(xué)信息系統(tǒng)

關(guān)鍵詞
Auto•Blend Plus^TM 技術(shù)，陽離子交換，抗體，IEX，SCX，色譜，生物分離，蛋白質(zhì)，方法開發(fā)，穩(wěn)定性

簡介
在表征和監(jiān)測治療性蛋白質(zhì)的質(zhì)量屬性時，電荷變異體分析非常關(guān)鍵。脫酰胺化、N端焦谷氨酸基團(tuán)修飾、異構(gòu)化、唾液酸化聚糖和C端賴氨酸裁剪等蛋白質(zhì)修飾作用都會導(dǎo)致電荷變異體的形成¹。在某些情況下，這些變化會影響治療性蛋白質(zhì)的鍵合、生物活性、患者安全性和保質(zhì)期。

生物制藥行業(yè)通過離子交換色譜（IEX）和等電聚焦（IEF）凝膠電泳等方法來對電荷變異體進(jìn)行表征。離子交換色譜法使用方便、適用性廣并且分離度高，因此對于生物治療性藥物開發(fā)特別有用。

如果要對生物制藥開發(fā)過程中治療性蛋白質(zhì)的電荷異質(zhì)性進(jìn)行深入表征，就需要穩(wěn)定高效的IEX方法。在開發(fā)方法時，通常會對所有可能涉及到的實(shí)驗(yàn)參數(shù)進(jìn)行全面評估，例如緩沖液/離子強(qiáng)度、緩沖液pH值、鹽梯度、流速和柱溫等。然而，想要系統(tǒng)性地評估各個實(shí)驗(yàn)參數(shù)對分離性能的影響，往往需要進(jìn)行冗長的迭代過程，這涉及到各種不同成分緩沖液的制備和測試。

緩沖液制備的差異可能會導(dǎo)致結(jié)果不一致，進(jìn)而延長方法開發(fā)時間。Waters® Auto•Blend Plus技術(shù)利用ACQUITY UPLC H-Class系統(tǒng)的四元溶劑管理技術(shù)，使用純?nèi)軇┖透邼舛刃揎梽﹥�備液來解決這些問題。利用Auto•Blend Plus技術(shù)計(jì)算每種儲備液的混合百分比獲得所需pH值，從而減少錯誤、降低耗材用量并縮短開發(fā)時間。

UNIFI生物制藥平臺解決方案因集成了上述特性，非常適用于穩(wěn)定的方法開發(fā)，并輕松實(shí)現(xiàn)自動化，從而提高工作效率。本應(yīng)用紀(jì)要旨在展示Auto•Blend Plus技術(shù)在使用離子交換（IEX）方法進(jìn)行電荷變異體分離方法優(yōu)化過程中的高效率和穩(wěn)定性。本應(yīng)用紀(jì)要使用嵌合單克隆抗體英夫利昔單抗作為治療性蛋白質(zhì)應(yīng)用示例。

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