沃特世解決方案——乳制品中核苷酸分析

乳粉中添加尿苷酸（UMP）、胞苷酸（CMP）、腺苷酸（AMP）、鳥苷酸（GMP）、肌苷酸（IMP）等多種核苷酸，用來提高嬰兒的免疫調節(jié)功能和記憶力。

 

核苷酸分析目前存在的挑戰(zhàn)：

由于核苷酸極性很大，用反相色譜柱很難達到很好的保留和分離，所以為了提高核苷酸的保留往往會嘗試離子對色譜方法，離子對色譜方法存在以下問題：

1.   容易起泡，管路中有氣泡，影響分析

2.   平衡時間長，延長了分析工作時間

3.   難以清洗，對色譜柱有損傷

4.   易變質，容易堵塞管路，損傷儀器

 

1.   避免使用離子對試劑，僅需要使用揮發(fā)性乙酸銨、乙腈體系

2.   建議使用Oasis^® HLB SPE小柱利用通過凈化方式進行乳粉樣品前處理，提供更潔凈的樣品，提高靈敏度、延長色譜柱及儀器壽命

3.   使用Amide色譜柱分析，用一般反相流動相保留極性化合物，方法簡單快速

 

5種核苷酸混合標準品的6針連續(xù)進樣分析結果

實際樣品6針連續(xù)進樣分析圖譜

 

本實驗采用Waters ACQUITY UPLC^® H-Class 系統(tǒng)，BEH^TM Amide 1.7μm 2.1*100mm色譜柱，對嬰幼兒奶粉中的5種核苷酸進行分析方法的開發(fā)，實驗結果表明：

 

1.    在Waters ACQUITY UPLC H-Class 系統(tǒng)上，采用BEH Amide 1.7μm 2.1*100mm色譜柱能迅速分離奶粉中5種核苷酸標準品，且5種化合物的分離度均在3.0以上；對于實際的奶粉樣品，5種核苷酸樣品及雜質之間的分離度均在1.6以上。

2.    該分析方法重現(xiàn)性好。其中，奶粉樣品6次連續(xù)進樣分析結果中，5種核苷酸保留時間RSD值均小于0.12%。

3.    Waters ACQUITY UPLC H-Class 系統(tǒng)，具有四元溶劑的Auto•Blend Plus^TM功能，因此，在該系統(tǒng)上進行方法開發(fā)非常靈活、方便，節(jié)約了溶劑配置的大量時間，大大提高了實驗的效率，從而大幅度的降低了實驗的溶劑消耗，降低了實驗成本。