原料乳與乳制品中三聚氰胺的檢測方案

【三聚氰胺】
據醫學專家介紹，三聚氰胺原本是一種低毒性化工原料，動物實驗結果表明，其在動物內代謝且不會存留，主要影響泌尿系統，不法商人在某個環節添加入乳制品中，可以人為提高表觀蛋白質的含量，從而達到以次充好，獲取利益的目的，但由于嬰幼兒每天食用奶粉量大，造成三聚氰胺的大量攝入從而引起嬰幼兒的泌尿系統疾患，在患兒的尿液中甚至是腎臟細胞中都能檢測出來，嚴重者甚至會發展為腎功能不全。
                          

【檢測標準】
奧普斯科技參照GB/T22388-2008檢測標準，采用Welchrom P-SCX固相萃取柱和XB-C18液相色譜柱，建立了原料乳與乳制品中三聚氰胺的前處理方法和高效液相色譜儀檢測方法，為廣大色譜工作者提供最有利的技術支持，讓三聚氰胺無所遁形。

【檢測方案】
1.適用范圍
適用于原料乳、乳制品以及乳制品中三聚氰胺的定量（適合GB/T22388-2008）
2.提取步驟
稱取2g(精確至0.01g)試樣與50ml具塞塑料離心管中，加入15ml1%三聚乙酸和5ml乙腈，超聲提取10min，再振蕩提取10min后，以不低于4000r/min離心10min,上清液經三氯乙酸溶液潤濕的濾紙過濾后，用三氯乙酸溶液定容至25ml，移取5ml濾液，加入5ml水，混勻后待凈化液。
3.SPE凈化步驟
SPE柱：P-SCX固相萃取柱（60mg/3ml）
SPE步驟
1）活化：依次加入3ml甲醇、5ml水活化，流出液棄去；
2）上樣：將提取液加入P-SCX柱中，流出液棄去；
3）淋洗：一次用3ml水、3ml甲醇淋洗，淋洗液棄去；
4）洗脫:用6ml 5%氨水-甲醇溶液洗脫，收集洗脫液；
5）濃縮：5度氮氣或者水浴蒸發至干，殘留物用1ml流動相定容，渦旋混合1min，過微孔濾膜后，供HPLC分析。
注：整個固相萃取全過程采用的自然重力流速過柱，不需要加壓也不需要抽真空。
           
4.色譜條件
實驗儀器：APS80-16A二元高壓液相色譜儀
色譜柱：XB-C18（4.6*250mm,5um）
流動相：乙腈離子對試劑緩沖液/乙腈=90/10(混勻，走單泵)
流速：1.5ml/min
進樣量：10ul
柱溫：40℃
檢測波長：240nm
注：離子對試劑緩沖液配制方法。準確稱取2.1g檸檬酸和2.16g辛烷磺酸鈉，加入約980ml水溶解，調節PH值至3.0后，定容至1L備用。
5.色譜圖和加標回收率結果