總蛋白染色劑替代麗春紅S用于熒光Western Blots的優(yōu)勢

麗春紅S是一種快速，可逆的蛋白質(zhì)染色劑，通常用于確認(rèn)蛋白樣品是否成功地從凝膠轉(zhuǎn)移到膜上，然后研究人員進(jìn)行免疫印跡過程。 轉(zhuǎn)印后對膜進(jìn)行染色可以在用抗體孵育印跡之前快速且容易地識別一些轉(zhuǎn)印的問題，例如由于存在氣泡而導(dǎo)致的條帶不完全、不均勻的轉(zhuǎn)移和偽影。 此外，染色膜上的總蛋白為總蛋白標(biāo)準(zhǔn)化定量提供了標(biāo)準(zhǔn)。
然而，盡管麗春紅染色是可逆的，但它與熒光Western印跡檢測不相容。 即使在徹底脫色后，麗春紅染色也會在膜上留下自發(fā)熒光殘留物，增加背景熒光。
下圖顯示了多色熒光蛋白印跡。 右半部分使用麗春紅染色，然后在免疫印跡前進(jìn)行脫色。