復合因素結合DNCB誘導的特應性皮炎脾虛濕蘊證小鼠模型的構建方法
研究進展 | 如何構建特應性皮炎脾虛濕蘊證小鼠模型
廣州中醫藥大學陳達燦、晏烽根團隊發表于《中藥新藥與臨床藥理》的研究論文首次建立了 “外濕 + 飲食失節 + 番瀉葉灌胃” 復合因素結合 DNCB 誘導的特應性皮炎脾虛濕蘊證病證結合小鼠模型，為中醫藥干預特應性皮炎的機制研究、藥效評價提供了工具。
研究背景
特應性皮炎是全球高發的慢性炎癥性皮膚病，中醫將其歸為 “四彎風” 范疇，嶺南地區患者多表現為 “脾虛濕蘊證”—— 脾胃運化失調致濕邪內生、郁于肌膚，引發皮損滲液、反復發作。但此前缺乏同時具備 “特應性皮炎病理特征” 和 “脾虛濕蘊證中醫指征” 的動物模型，制約了中醫藥作用機制的研究。
模型構建
團隊采用 Balb/c 小鼠分 4 組實驗（正常組、AD 組、脾虛濕蘊證組、脾虛濕蘊型 AD 組），創新構建模型：
檢測工具
研究中，團隊采用ASCH VAPOSCAN 經皮水分流失測量儀作為皮膚屏障功能的評價工具，在室溫 23-26℃、濕度 40%-55% 的標準化條件下，通過探頭緊貼小鼠背部皮損區，快速獲取經皮水分流失（TEWL）值，反映皮膚屏障完整性：
研究發現
研究意義
該模型同時再現了特應性皮炎的病理損傷（紅斑、屏障受損）和脾虛濕蘊證的中醫指征（腹瀉、代謝紊亂），解決了傳統 AD 模型缺乏中醫證候特征的問題�？蔀楹罄m脾虛濕蘊型特應性皮炎的病理機制研究、中藥復方藥效評價、藥理靶點篩選提供可靠的實驗載體，推動中醫藥治療皮膚病的現代化研究。
參考文獻：
[1] 鐘婷靖，劉秦，黎雄，等。特應性皮炎脾虛濕蘊病證結合動物模型的構建與評價 [J]. 中藥新藥與臨床藥理，2024, 35 (6): 862-869. https://doi.org/10.19378/j.issn.1003-9783.2024.06.011
[2] Li X, Feng L Y, Zhong T J, et al. Gu-Ben-Hua-Shi (AESS) formula ameliorates atopic dermatitis via regulating NLRP3 signaling pathways[J]. Saudi Pharmaceutical Journal, 2023, 31: 101792. https://doi.org/10.1016/j.jsps.2023.101792
廣州中醫藥大學陳達燦、晏烽根團隊發表于《中藥新藥與臨床藥理》的研究論文首次建立了 “外濕 + 飲食失節 + 番瀉葉灌胃” 復合因素結合 DNCB 誘導的特應性皮炎脾虛濕蘊證病證結合小鼠模型，為中醫藥干預特應性皮炎的機制研究、藥效評價提供了工具。
研究背景
特應性皮炎是全球高發的慢性炎癥性皮膚病，中醫將其歸為 “四彎風” 范疇，嶺南地區患者多表現為 “脾虛濕蘊證”—— 脾胃運化失調致濕邪內生、郁于肌膚，引發皮損滲液、反復發作。但此前缺乏同時具備 “特應性皮炎病理特征” 和 “脾虛濕蘊證中醫指征” 的動物模型，制約了中醫藥作用機制的研究。
模型構建
團隊采用 Balb/c 小鼠分 4 組實驗（正常組、AD 組、脾虛濕蘊證組、脾虛濕蘊型 AD 組），創新構建模型：
- 脾虛濕蘊證誘導：95% 高濕環境飼養（外濕）+ 單日高脂飼料 / 雙日禁食（飲食失節）+ 番瀉葉冷浸液灌胃（加重脾虛），全程持續至取材；
- 特應性皮炎誘導：第 19 天起背部剃毛，先后用 1% DNCB 致敏、0.5% DNCB 激發，每周 3 次持續 3 周，模擬 AD 病理損傷。
檢測工具
研究中，團隊采用ASCH VAPOSCAN 經皮水分流失測量儀作為皮膚屏障功能的評價工具，在室溫 23-26℃、濕度 40%-55% 的標準化條件下，通過探頭緊貼小鼠背部皮損區，快速獲取經皮水分流失（TEWL）值，反映皮膚屏障完整性：
- 與單純 AD 組相比，脾虛濕蘊型 AD 組的 TEWL 值呈上升趨勢，表明脾虛濕蘊證會加重皮膚屏障損傷；
- 結合 EASI 評分（皮損嚴重程度）發現，脾虛濕蘊型 AD 組皮損紅斑、腫脹、糜爛更嚴重，且 EASI 評分高于單純 AD 組（P<0.05），證實模型同時具備 “證” 與 “病” 的雙重特征。
研究發現
- 宏觀表現：脾虛濕蘊型 AD 組小鼠出現肥胖、精神萎靡、毛發污穢油膩、腹瀉等典型脾虛濕蘊證表現，體質量下降幅度大于單純 AD 組（P<0.05）；
- 免疫指標：脾虛濕蘊證會加重 AD 導致的胸腺系數降低（P<0.05），提示免疫系統損傷更明顯；
- 生化指標：脾虛濕蘊型 AD 組小鼠葡萄糖、胃泌素水平升高（P<0.05），淀粉酶水平降低，符合脾虛濕蘊證的代謝特征。
研究意義
該模型同時再現了特應性皮炎的病理損傷（紅斑、屏障受損）和脾虛濕蘊證的中醫指征（腹瀉、代謝紊亂），解決了傳統 AD 模型缺乏中醫證候特征的問題�？蔀楹罄m脾虛濕蘊型特應性皮炎的病理機制研究、中藥復方藥效評價、藥理靶點篩選提供可靠的實驗載體，推動中醫藥治療皮膚病的現代化研究。
參考文獻：
[1] 鐘婷靖，劉秦，黎雄，等。特應性皮炎脾虛濕蘊病證結合動物模型的構建與評價 [J]. 中藥新藥與臨床藥理，2024, 35 (6): 862-869. https://doi.org/10.19378/j.issn.1003-9783.2024.06.011
[2] Li X, Feng L Y, Zhong T J, et al. Gu-Ben-Hua-Shi (AESS) formula ameliorates atopic dermatitis via regulating NLRP3 signaling pathways[J]. Saudi Pharmaceutical Journal, 2023, 31: 101792. https://doi.org/10.1016/j.jsps.2023.101792
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