徑向流色譜技術簡介

生物制品原液的純化工藝開發及生產制備是藥品研發及生產中必不可少的環節，尤其對于重組蛋白類或病毒載體類生物制品。純化流程通常包括緩沖液配制、裝柱及平衡、樣品準備、上樣、淋洗、洗脫、收樣、柱再生、儀器沖洗等環節，工序復雜、耗時費力。

通常生物大分子嬌弱的性質導致純化工序一般不能中斷，必須連續操作，對于工藝復雜的制品，從上游發酵到原液制備往往能達到十數天，而加班就如同家常便飯，起早貪黑、披星戴月就是日常操作。

難道就沒有一種辦法解救一下科研狗嗎？當然不是。

三十多年前，Sepragen發明了徑向流色譜技術并取得專利，該技術不同于傳統的軸向流色譜技術，其流體在柱內從一端流向另一端，徑向流色譜柱流動相攜帶樣品沿徑向遷移。在徑向流色譜柱內，流動相和樣品可以從色譜柱的周圍流向柱圓心，也可以從柱圓心流向柱的周圍。

基于徑向流色譜技術。柱子有三個環形通道（如Figure.1），內外通道橫截面積相等并將流體引至出口，中間通道裝載色譜填料。

這種獨特的徑向流設計使色譜柱非常適合高通量分離技術，如離子交換色譜技術、親和色譜技術、疏水色譜技術、反相色譜技術和其他形式的吸附-解吸色譜技術。  

Figure.1

Superflo®柱基于徑向流色譜技術。由于外通道的橫截面積較大且床層深度較低，所以Superflo®柱可支持非常高的流速和非常低的運行壓力。 

• 反壓更低、流速更快，層析時間節省4倍

• 易于放大，放大后占地更小

• 更好的柱效及分離趨勢

• 防止濃度依賴沉淀和蛋白降解，提高收率

• 易于使用，無需拆卸即可實現填料安裝和卸除
   

對于傳統層析柱，裝柱高度通常介于10-30cm,個別友商甚至高于30cm, 較高的填裝高度帶來較大的反壓，較低的線性流速，導致層析時間的延長。

徑向色譜技術由于獨特的專利設計，中試柱床深（相當于傳統柱的柱高）低至5cm,生產級別低至10cm, 較低的床深帶來較低的反壓、更快的線性流速，另外其填料上表面積顯著大于下表面積，進一步利于降低反壓及提升線性流速，通常徑向色譜柱層析時間相比傳統柱能節省4倍以上。
 

1） Saxena Vinit．Chromatography column using horizontal flow，US19850794727A

2） Vinit Saxena, Pinole, Calif. Chromatography column using horizontal flow，US19860869295A

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Sepragen及其徑向流色譜技術在方法開發和下游純化的應用