關(guān)于Luminex MagPix 磁珠酶免疫分析平臺(tái)的答疑

Luminex MagPix 磁珠酶免疫分析平臺(tái)

多功能的MAGPIX 只需一臺(tái)即可達(dá)到多臺(tái)儀器共同作用才能完成的效果，具有更大的靈活性和更多的選擇性。無(wú)論是單一指標(biāo)還是多重指標(biāo)，檢測(cè)核酸還是蛋白，MAGPIX均可為您簡(jiǎn)化實(shí)驗(yàn)，提供高超的分析性能。

【Luminex常見(jiàn)問(wèn)題及解答】

LUMINEX應(yīng)用于哪些領(lǐng)域?  

生物醫(yī)學(xué)研究，生物標(biāo)記物開(kāi)發(fā)，臨床檢測(cè)等領(lǐng)域。Luminex技術(shù)主要用于蛋白和核酸檢測(cè)分析。   

LUMINEX敏感性如何？

靈敏度取決于開(kāi)頭的質(zhì)量。對(duì)于同樣的抗體對(duì)，Luminex檢測(cè)的靈敏度高于ELISA技術(shù)。一般檢測(cè)靈敏度在pg級(jí)。   

對(duì)不同類型的樣品制備和樣品量的要求是怎樣的？  

血清、血漿是常用的樣本，每次檢測(cè)需要10ul， 每次可以檢測(cè)多個(gè)蛋白。 從各種細(xì)胞或組織中提取的蛋白也可以用Luminex技術(shù)檢測(cè)，制備方法與ELISA、Western Blot完全一樣。   

一般可以檢測(cè)到多少基因或蛋白的表達(dá)信息？  

檢測(cè)蛋白和基因的數(shù)目主要取決于試劑盒。 蛋白質(zhì)檢測(cè)目前最高可以達(dá)到50個(gè)左右，基因檢測(cè)最高達(dá)500個(gè)。

如何保證檢測(cè)結(jié)果的特異性？

檢測(cè)的特異性取決于抗體高特異性。 試劑幾乎全部來(lái)源于知名度高的進(jìn)口品牌，產(chǎn)品經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格的質(zhì)量控制。同時(shí)，我們的操作嚴(yán)格按照SOP進(jìn)行。

客戶自己提供抗體，是否可以進(jìn)行LUMINEX檢測(cè)？

事實(shí)上，我們建議客戶自己提供試劑盒。唯一需要保證的是，客戶需要從正規(guī)渠道購(gòu)買(mǎi)。

除了蛋白，LUMINEX技術(shù)是否還可以用于其它指標(biāo)的檢測(cè)？

可以用于基因表達(dá)，基因多態(tài)性和HLA配型分析。   

檢測(cè)周期多久？  

視待測(cè)蛋白的種類、數(shù)量和標(biāo)本數(shù)量定。一般來(lái)說(shuō)，檢測(cè)一組蛋白（1-50個(gè)，視蛋白種類定）和一組標(biāo)本（多達(dá)360個(gè)標(biāo)）需要3-4小時(shí)的操作時(shí)間及基本數(shù)據(jù)分析。但是，檢測(cè)周期也取決于公司當(dāng)時(shí)的工作量。一般來(lái)說(shuō)，從標(biāo)本收到起，檢測(cè)應(yīng)在1-2周完成；但是部分蛋白試劑盒需要收到訂單后從美國(guó)進(jìn)口，檢測(cè)周期可能會(huì)延長(zhǎng)到4-5周。  

如何判定 LUMINEX數(shù)據(jù)表達(dá)水平差異有無(wú)意義？

表達(dá)差異主要取決于標(biāo)本的性質(zhì)和數(shù)量，我們公司為客戶提供專業(yè)的數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)服務(wù)。  

 LUMINEX實(shí)驗(yàn)和流式細(xì)胞儀的優(yōu)劣比較?   

Luminex技術(shù)是流式細(xì)胞儀和微球相結(jié)合的蛋白、核酸檢測(cè)技術(shù)， 檢測(cè)對(duì)象是蛋白質(zhì)、DNA等大分子。普通流式細(xì)胞儀主要用于檢測(cè)整體細(xì)胞表面或細(xì)胞內(nèi)的蛋白表達(dá)情況。Luminex檢測(cè)蛋白和標(biāo)本數(shù)目大，是一種高通量檢測(cè)技術(shù)。普通流式細(xì)胞儀每次只能檢測(cè)幾種蛋白分子，而且檢測(cè)速度較慢，不適合高通量分析。 由此可見(jiàn)，兩種方法應(yīng)用方向有很大差別。   

報(bào)告的格式如何？  

報(bào)告以excel表格形式，包括每種蛋白在每個(gè)標(biāo)本中的表達(dá)量。公司也可以為客戶提供數(shù)理統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果。   

完成一個(gè)LUMINEX的實(shí)驗(yàn),需要的細(xì)胞的量是多少?  

至少10ul的血清、血漿，蛋白提取物， 或50-100萬(wàn)細(xì)胞。  

如何控制LUMINEX檢測(cè)的質(zhì)量？

我們對(duì)每一次檢測(cè)都設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線，并設(shè)定內(nèi)參進(jìn)行校正。我們會(huì)定期做儀器校正，檢測(cè)精密度和重復(fù)性實(shí)驗(yàn)以確保檢測(cè)結(jié)果的可靠性。  

實(shí)驗(yàn)失敗有幾種原因?  

從實(shí)驗(yàn)室角度看，成敗原因包括試劑盒的質(zhì)量，待測(cè)樣品稀釋倍數(shù)；待測(cè)蛋白質(zhì)低于儀器檢測(cè)底限，實(shí)驗(yàn)操作程序。從客戶角度看，成敗取決于樣品制備，保存和運(yùn)輸是否恰當(dāng)。我們公司可以提供規(guī)范操作程序，供客戶參考。   

得到實(shí)驗(yàn)的結(jié)果后, 可以進(jìn)行那些研究的工作?   

可進(jìn)行多方面的研究，例如：觀察不同實(shí)驗(yàn)條件對(duì)待測(cè)蛋白含量的影響，可進(jìn)行藥物作用靶點(diǎn)研究，不同人群血樣生物標(biāo)記物的研究，健康評(píng)估，疾病診斷，指導(dǎo)治療等。   

經(jīng)過(guò)分析后，若得到幾百個(gè)感興趣的基因或蛋白，如何對(duì)這些基因做功能分類或者Pathway相關(guān)分析呢？

分析方法與其它技術(shù)平臺(tái)一樣，我們公司可以提供全套有償服務(wù)。   

如何考慮LUMINEX重復(fù)實(shí)驗(yàn)的問(wèn)題？

我們每次都會(huì)對(duì)使用的標(biāo)準(zhǔn)品和內(nèi)參做重復(fù)性測(cè)定，同時(shí)也建議對(duì)每份樣本進(jìn)行重復(fù)2次測(cè)定。   

在進(jìn)行LUMINEX實(shí)驗(yàn)時(shí)，由于經(jīng)費(fèi)的限制，是否可以把多個(gè)樣品進(jìn)行混合以消除樣品的個(gè)體差異后再上LUMINEX檢測(cè)？  

不建議這么做。多個(gè)樣品做檢測(cè)，計(jì)算平均值和誤差才有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。如果多個(gè)樣品混合后測(cè)定只能算1份樣品。   

客戶是組織的樣品，準(zhǔn)備自己提取樣品，請(qǐng)問(wèn)樣品提取方面有沒(méi)什么技術(shù)要求？

需要采用對(duì)抗原抗體反應(yīng)，或者蛋白質(zhì)抗原性沒(méi)有抑制作用的提取液進(jìn)行提取，避免采用會(huì)造成蛋白質(zhì)變性的試劑，如高濃度的尿素或者鹽酸胍等。 需要能完全提取待測(cè)蛋白質(zhì)，否則對(duì)結(jié)果會(huì)造成誤判。   

提取以后需要怎么保存，怎么運(yùn)輸？  

建議保存于-80度。避免反復(fù)凍融。可用干冰或者至少用冰袋運(yùn)輸。   

LUMINEX的假陽(yáng)性率是多少?   

技術(shù)性的假陽(yáng)性率非常低，小于1%。生物假陽(yáng)性率取決于每個(gè)蛋白的生物學(xué)特征。   

是否可以將同一癥狀的病例混合后抽提,看共性表達(dá)?

可以。混合后的樣品將被視作單一樣品進(jìn)行檢測(cè)。

相關(guān)鏈接：

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