液相色譜柱正確使用方法

一、樣品方面

1.除去微粒及雜質(zhì)

2.了解樣品在流動(dòng)相中的溶解度

如溶樣品的溶劑不是流動(dòng)相，一定要用流動(dòng)相試溶解度，防止其在流動(dòng)相中析出

3.了解樣品與色譜柱的基質(zhì)/填料是否有相互作用

二、流動(dòng)相方面

1.除去微粒

純度的要求：超純水，梯度實(shí)驗(yàn)時(shí)水中有機(jī)雜質(zhì)含量要低；緩沖液的PH值，在填料的允許范圍內(nèi)；緩沖液（鹽）的濃度；有機(jī)溶劑：色譜純，雜質(zhì)含量盡量低，并與填料相匹配

2.流動(dòng)相對(duì)樣品的溶解度

有機(jī)溶劑或水的比例

三、色譜柱的清洗

對(duì)所做的樣品要有充分的了解，用對(duì)該樣品洗脫能力最強(qiáng)的流動(dòng)相清洗

硅膠柱的一般方法是先用甲醇洗去極性雜質(zhì)，然后用干燥的二氯甲烷、正庚烷100~200ml依次活化

鍵合相柱（烷基）的一般方法是用20倍體積的甲醇-氯仿-甲醇-水依次沖洗

（記住：每種色譜柱可能性有特定的方法，一定要先看其使用說明！）

四、色譜柱的存放

存放前的處理要除去雜質(zhì)、緩沖鹽

合適的存放溶劑

避免色譜柱床的干涸

避免機(jī)械震動(dòng)

防止細(xì)菌生長(zhǎng)

注意存放的溫度