十四種色譜常見使用問題的詳細解答

答：關于漂移問題：

1、溫度控制不好，解決方法是采用恒溫裝置，保持柱溫恒定。

2、流動相發生變化，解決辦法是防止流動相發生蒸發、反應等。

3、柱子未平衡好，需對柱子進行更長時間的平衡。

 

關于快速變化問題

1、流速發生變化，解決辦法是重新設定流速，使之保持穩定。

2、泵中有氣泡，可通過排氣等操作將氣泡趕出。

3、流動相不合適，解決辦法為改換流動相或使流動相在控制室內進行適當混合。

 

答：1、柱效要高

2、熱穩定性好

3、化學惰性強

 

具體選擇應注意：

1、柱極性。根據分析樣品選擇不同極性的柱子進行分析。

2、柱子內徑。內徑大小決定柱容量。

3、液膜厚度。分析樣品溫度一不一樣，對膜厚有不同要求，溫度高液膜要厚，溫度低液膜要薄。

4、柱長度。柱越長，柱效越高，分離效果越好，但也存在吸附問題，柱子過長，分析時間長，因此要根據樣品考慮柱子長度。

5、外涂層(柱體)的選擇。

6、另外還有儀器型號、分析對象等因素。

 

答：1、篩板堵塞或柱失效，解決辦法是反向沖洗柱子，替換篩板或更換柱子。

2、存在干擾峰，解決辦法為使用較長的柱子，改換流動相或更換選擇性好的柱子。

 

答：1、分配容量(或容量因子)K，好的柱子在高溫運行后，分配容量K不應有明顯的下降，否則，說明柱子的熱穩定性不好。

2、理論塔板數n，熱穩定性好的柱子經受高溫后，理論塔板數應基本保持恒定。

3、柱子的極性。熱穩定性好的柱子，高溫前后極性變化不大，具體表現為保留指數I值沒有大的變化。

4、噪聲。熱穩定性好的柱子在高溫下使用后，噪聲不能增加。

5、柱子的去活層，毛細管柱子涂固定液前內部一般要用去活性試劑去活以增加惰性。質量好的毛細管柱子高溫后，去活層不應該變化，表現在對強極性樣品或酸堿性樣品的吸附性不能增加。

 

答：進樣器內的玻璃襯套主要有下列作用：

1、提供一個溫度均勻的汽化室，防止局部過熱。

2、玻璃的惰性不如不銹鋼好，減少了在汽化期間樣品分解的可能性。

3、易于拆換清洗 ，以保持清潔的汽化室表面，一些痕量非揮發性組分會逐漸積累殘存于汽化室，高溫下會慢慢分解，使基流增加，噪聲增大，通過清洗玻璃襯套可以消除這種影響。

4、可根據需要選擇管壁厚度及內徑適宜的玻璃襯套，以改變汽化室的體積，而不用更換整個進樣加熱塊。從以上幾個方面可以知道玻璃襯套對色譜行為造成影響的原因。

 

答：1、進樣器溫度太低，樣品汽化不完全，發生分級分流。

2、進樣器溫度太高，某些組分可能發生熱分解，也有的樣品可能發生催化分解，或樣品部分地被吸附在進樣器內表面上。

3、在分流點以前樣品沒有混合均勻或混合不充分。

4、系統的進樣墊，柱接頭等地方漏氣。

 

答：1、樣品量不足：解決辦法為增加樣品量。

2、樣品未從柱子中流出：可根據樣品的化學性質改變流動相或柱子。

3、樣品與檢測器不匹配：根據樣品化學性質調整波長或改換檢測器。

4、檢測器衰減太多：調整衰減即可。

5、檢測器時間常數太大：解決辦法為降低時間參數。

6、檢測器池窗污染：解決辦法為清洗池窗。

7、檢測池中有氣泡：解決辦法為排氣。

8、記錄儀測壓范圍不當：調整電壓范圍即可。

9、流動相流量不合適：調整流速即可。

10、檢測器與記錄儀超出校正曲線：解決辦法為檢查記錄儀與檢測器，重作校正曲線。

 

答：原因可能有：

1、泵內有空氣，解決的辦法是清除泵內空氣，對溶劑進行脫氣處理。

2、比例閥失效，更換比例閥即可。

3、泵密封墊損壞，更換密封墊即可。

4、溶劑中的氣泡，解決的辦法是對溶劑脫氣，必要時改變脫氣方法。

5、系統檢漏，找出漏點，密封即可。

6、梯度洗脫，這時壓力波動是正常的。

 

答：聚合物，尤其是一些含氮、硫及鹵素的高分子裂解時，常有焦油狀物質產生。為防止這種焦油狀物質進入毛細柱造成污染而使柱性能下降，可采用保護預柱，即在裂解器與毛細柱之間接一填充預柱，通過控制預柱溫度而使焦油狀物質滯留在預柱內，預注可置于GC氣化室內，這樣既容易控制溫度，又減少系統的死體積，當然，預柱填料需經常更換。

 

答：這是因為被分析物可能具有形成氫健的能力。盡管過去幾年來，填料的制造技術有了極大的提高，但不同的廠商的ODS填料表面硅醇基的濃度不同。正是這些硅醇基可能與樣品發生相互作用。因此，同一被分析物中的各組分在不同牌號的ODS柱上的相對保留時間就可能不同。在流動相中加入少量競爭物，如三乙基胺(TEA)，將會使硅醇基的成鍵能力飽和，從而保證不同牌號柱子上的相對保留時間具有較好的重現性。

 

答：柱壓過高是HPLC柱用戶最常碰到的問題。其原因有多方面，而且常常并不是柱子本身的問題，您可按下面步驟檢查問題的起因。

1、拆去保護柱，看柱壓是否還高，否則是保護柱的問題，若柱壓仍高，再檢查。

2、把色譜柱從儀器上取下，看壓力是否下降，否則是管路堵塞，需清洗，若壓力下降，再檢查。

3、將柱子的進出口反過來接在儀器上，用10倍柱體積的流動相沖洗柱子，(此時不要連接檢測器，以防固體顆粒進入流動性)。這時，如果柱壓仍不下降，再檢查。

4、更換柱子入口篩板，若柱壓下降，說明你的溶劑或樣品含有顆粒雜質，正是這些雜質將篩板堵塞引起壓力上升。若柱壓還高，請與廠商聯系。一般情況下，在進樣器與保護柱之間接一個在線過濾器便可避免柱壓過高的問題，SGE提供的Rheodyne7315型過濾器就是解決這一問題的最佳選擇。

 

答：毛細柱壽命除決定于柱子本身的性能外，在很大程度上取決于使用情況，比如使用溫度、樣品狀態，進樣量等，如果在其使用溫度范圍內，樣品干凈，色譜柱不被污染的情況下，柱子壽命一般在2-3年之間。

 

答：根據柱污染程度可采取不同的方法來解決，如果污染不嚴重，污染物沸點不是太高，可通過老化來解決，但老化溫度不可超過柱子的最高使用溫度，且一般要較長時間(8-30小時)，如果污染較嚴重，或通過老化仍不能使柱性能恢復，那就必須采用溶劑清洗，通常是用5倍柱容積的溶劑(如正戊烷，二氯甲烷等)通過色譜柱。當然，清洗溶劑用的越多，對柱性能的損壞越大，清洗完后，在通載氣老化一定時間，如果柱性能恢復，便可繼續使用。必須指出：只有交聯柱才能清洗，對于非交聯柱，清洗柱會徹底失效，因為固定液被洗掉了，至于清洗用溶劑的選擇，可參考說明書。

 

答：完全可以，BPX70為極性柱，使用溫度范圍寬(25-260℃)，程序升溫可達290℃，流失低，適合于分析脂肪酸甲酯的各種位置和幾何異構體，藥物異構體，碳水化合物等。因BPX70為交聯住，故用于GC/MS很穩定，污染后可清洗再生。