血清中25-羥基維生素D半自動SPE高通量分析方法

一種適用于高通量血清中25-羥基維生素D分析的新型半自動化固相萃取方法
Billy J Molloy, Lisa J Calton PhD, Donald P Cooper PhD
沃特世公司(英國曼徹斯特)

簡介

近年來，血清中25-羥基維生素D(25OHD)的 分析需求大大增加。維生素D除了影響骨骼代謝之外，如今的一些臨床研究還表明維生素D缺乏癥與某些癌癥、多發(fā)性硬化癥和心臟疾病的增發(fā)風險有關(guān)^1,2。 25OHD的濃度被認為是表征維生素D水平的臨床指標³，并且對監(jiān)測補充治療具有重要意義，它具有維生素D2和維生素D3兩種形式。當25-羥基維生素D2(25OHD2)的抗體交叉反應低于100%時，一些免疫檢測方法可能無法測出維生素D2補充治療患者的25OHD總濃度⁴。因此，現(xiàn)在許多臨床實驗室都采用基于LC/MS/MS的方法測定25OHD，以實現(xiàn)25OHD2和25-羥基維生素D3(25OHD3)的可靠定量。利用LC/MS/MS分析25OHD需要對樣品進行預處理，使25OHD從維生素D結(jié)合蛋白中釋放出來，最大程度降低基質(zhì)效應。但是，這些步驟不僅耗時，而且在樣品轉(zhuǎn)移時易引入人為誤差。

本應用紀要介紹了一種半自動化樣品預處理方案，可從最初的試管操作到結(jié)果處理對樣品進行全程追蹤，最后采用UPLC/MS/MS分析25OHD。

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