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          高效液體相色譜法(HPLC)“瘦肉精”檢測的液體處理

          瀏覽次數(shù):3420 發(fā)布日期:2012-11-7  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責任自負
          孟文峰   李海洋  2012.10.24
          (RXS-200標樣稀釋儀、EL系列多功能液體操作儀—實現(xiàn)精確稀釋)(附操作視頻)
           
          簡介
          “瘦肉精”是一類動物用藥,有數(shù)種藥物被稱為“瘦肉精”,例如萊克多巴胺(Ractopamine)及克倫特羅(Clenbuterol)等!笆萑饩蹦苁关i提高生長速度、增加瘦肉率、豬毛色光亮,賣相好、減少飼料使用、使肉品提早上市、降低成本。但對人體會產(chǎn)生副作用,輕則導致心律不齊,嚴重會導致心臟病。
           
          目前檢測瘦肉精的方法有:氣相色譜-質(zhì)譜法(GC-MS)、高效液相色譜法(HPLC)、霉聯(lián)免疫吸附法(ELISA)和液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法(HPLC-MS/MS)等。
           
          現(xiàn)以高效液相色譜法為例,分別介紹RXS-200標樣稀釋儀、EL系列多功能液體操作儀—在液體處理方面的應用。
           
          實驗目的:
          定量檢測樣品中豬肉鹽酸克倫特羅的含量
          應用行業(yè):食品檢測
           
          實驗步驟:
          第一步:進行樣品處理,設(shè)定色譜條件,使用高效液相色譜儀進樣10ul分析。
          第二步:按照下表制備標準序列液
          樣品杯號
          1
          2
          3
          4
          5
          6
          母液
          鹽酸克倫特羅試劑
          (100ug/ml)
          200ul
          400ul
          600ul
          800ul
          1000ul
          2000ul
          稀釋液
          蒸餾水
          9800ul
          9600ul
          9400ul
          9200ul
          9000ul
          8000ul
          濃度(100ug/ml)
          2
          4
          6
          8
          10
          20
          稀釋比
          2%
          4%
          6%
          8%
          10%
          20%
           
          一:使用EL-211(雙通道)多功能液體操作儀制備標準序列液
          1. 執(zhí)行充液任務(wù),使稀釋液充滿整個管路
          2. 按照軟件向?qū)Ы⑾♂屓蝿?wù),稀釋模式選擇“自定義”將各序列液的稀釋比設(shè)置界面,稀釋后的總體積設(shè)置為10ml
          3.點“執(zhí)行”按鈕,按照提示操作,按手動按鈕,先進行空氣隔離,然后母液從手柄端口吸入系統(tǒng):
          4. 按“手柄按鈕”或觸摸屏的“確定”按鈕或 “腳踏板”,儀器將第一個序列液分配到試管1中;
          5. 重復以上操作“2”“3”“4”步驟,序列液分配到試管2中,依次類推制備其他各序列液
           
          二:使用RXS-200標樣稀釋儀制備標準序列液
          1.將子母液的注射器充滿對應的液體,將出液口空氣排干凈;
          2.進入“手動工作準備”界面,對S1和S2進行下復位操作,然后把注射器裝上儀器并且將針管安裝好;
          3.返回主界面,點擊“序列稀釋”,進入該界面進行參數(shù)設(shè)定,選擇“自由單排模式”、稀釋次數(shù)設(shè)為“6”、稀釋比參數(shù)選擇“逐個”和“比例遞增”、初始%值設(shè)為“2”、體積/母液濃度參數(shù)選中“等總體積”輸入值10ml;
          4.點擊“啟動任務(wù)”,然后將試管1的口對準設(shè)備針管出液口,點擊界面上的“確定”或者面板上的按鍵開關(guān),進行取液,完畢后得到1號稀釋液;按照界面提示操作,依次類推,取出2、3、4、5、6號稀釋液。
           
          第三步:將各序列液依次進樣10ul分析,用鹽酸克倫特羅試劑(100ug/ml)為對照,用保留時間進行定性,用峰面積定量;
          第四步:依照公式進行計算:
          X={(m/1000)/1000}/{(M/1000)/V1}×(V2/1000)
           
          X: 樣品中鹽酸克倫特羅含量(mg/kg);M;樣品取樣量(g); m:樣品中鹽酸克倫特羅(ng);V1:樣品定容體積 ;  V2:樣品進樣體積(ul)
           
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          發(fā)布者:嘉興貝塔儀器有限公司
          聯(lián)系電話:0573-84291995
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