沃特世解決方案——乳制品中核苷酸分析

乳粉中添加尿苷酸（UMP）、胞苷酸（CMP）、腺苷酸（AMP）、鳥(niǎo)苷酸（GMP）、肌苷酸（IMP）等多種核苷酸，用來(lái)提高嬰兒的免疫調(diào)節(jié)功能和記憶力。

 

核苷酸分析目前存在的挑戰(zhàn)：

由于核苷酸極性很大，用反相色譜柱很難達(dá)到很好的保留和分離，所以為了提高核苷酸的保留往往會(huì)嘗試離子對(duì)色譜方法，離子對(duì)色譜方法存在以下問(wèn)題：

1.   容易起泡，管路中有氣泡，影響分析

2.   平衡時(shí)間長(zhǎng)，延長(zhǎng)了分析工作時(shí)間

3.   難以清洗，對(duì)色譜柱有損傷

4.   易變質(zhì)，容易堵塞管路，損傷儀器

 

1.   避免使用離子對(duì)試劑，僅需要使用揮發(fā)性乙酸銨、乙腈體系

2.   建議使用Oasis^® HLB SPE小柱利用通過(guò)凈化方式進(jìn)行乳粉樣品前處理，提供更潔凈的樣品，提高靈敏度、延長(zhǎng)色譜柱及儀器壽命

3.   使用Amide色譜柱分析，用一般反相流動(dòng)相保留極性化合物，方法簡(jiǎn)單快速

 

5種核苷酸混合標(biāo)準(zhǔn)品的6針連續(xù)進(jìn)樣分析結(jié)果

實(shí)際樣品6針連續(xù)進(jìn)樣分析圖譜

 

本實(shí)驗(yàn)采用Waters ACQUITY UPLC^® H-Class 系統(tǒng)，BEH^TM Amide 1.7μm 2.1*100mm色譜柱，對(duì)嬰幼兒奶粉中的5種核苷酸進(jìn)行分析方法的開(kāi)發(fā)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：

 

1.    在Waters ACQUITY UPLC H-Class 系統(tǒng)上，采用BEH Amide 1.7μm 2.1*100mm色譜柱能迅速分離奶粉中5種核苷酸標(biāo)準(zhǔn)品，且5種化合物的分離度均在3.0以上；對(duì)于實(shí)際的奶粉樣品，5種核苷酸樣品及雜質(zhì)之間的分離度均在1.6以上。

2.    該分析方法重現(xiàn)性好。其中，奶粉樣品6次連續(xù)進(jìn)樣分析結(jié)果中，5種核苷酸保留時(shí)間RSD值均小于0.12%。

3.    Waters ACQUITY UPLC H-Class 系統(tǒng)，具有四元溶劑的Auto•Blend Plus^TM功能，因此，在該系統(tǒng)上進(jìn)行方法開(kāi)發(fā)非常靈活、方便，節(jié)約了溶劑配置的大量時(shí)間，大大提高了實(shí)驗(yàn)的效率，從而大幅度的降低了實(shí)驗(yàn)的溶劑消耗，降低了實(shí)驗(yàn)成本。