專用氨基酸分析方案用于細胞培養過程監控以及確定蛋白質結構

簡介

沃特世近期推出的 AccQ•Tag™ Ultra 氨基酸專用分析方案有更高的分離度和靈敏度，確保用戶得到精確可靠的氨基酸定性和定量分析結果。這個方案來源于已經被廣泛使用和認可的 AccQ•Tag 柱前衍生方法，得到的衍生物用沃特世 ACQUITY UPLC ® （超高效液相色譜）系統進行分離，可達到最佳分離度和更高的靈敏度，分析時間更短。系統控制，數據采集、處理和報告由 Empower™ 軟件進行。這是一個整體解決方案，針對不同應用的儀器方法和數據處理方法都已經在應用光盤內預先設定好，直接調用即可獲得進行分析。

UPLC 氨基酸分析應用方案

設計重點與成功分析的關鍵

• 所有氨基酸都達到基線分離

• 對每個峰進行準確定性

• 衍生反應副產物同氨基酸衍生物可以完全分離

• 3 個數量級的動態線性范圍，保證對不同濃度水平的氨基酸準確定量

• 足夠的電噴霧離子化靈敏度與穩定性

衍生反應過程示意圖

使用 AccQ•Tag Ultra 衍生試劑（ 6- 氨基喹啉 -N- 羥基琥珀酰亞氨基甲酸酯）對氨基酸進行衍生，伯氨基酸和仲氨基酸均可快速、定量完成衍生反應，操作簡便，衍生反應還可以自動化進行（ batch wise ）。

• 衍生反應在大量水溶液存在的條件下進行，對不同緩沖液體系和不同組成的樣品均可得到可靠的結果

• 樣品無需進行特殊處理，也不需要真空干燥或提取

• 樣品經衍生后的產物可穩定保存幾天

• 過量的衍生試劑可在一分鐘內水解為不干擾測定的 AMQ ，因此不需要去除過量衍生試劑的操作

• 衍生反應副產物同氨基酸衍生物可以通過色譜達到完全分離

為監測細胞培養過程中發酵液的成分，或者對發酵用培養基進行質量控制，需要分離其它種類的氨基酸。與標準分析方法相比，分析細胞培養液中的氨基酸在分析方法的參數設置上有些不同： AccQ•Tag Ultra 洗脫劑 A （濃縮液）的稀釋倍數不同，還需要較高的柱溫。其它參數相同。