通過加入糖進(jìn)行蜂蜜摻假的LC-IRMS 測定

化學(xué)分析：

新近發(fā)展的LC-IRMS ( 液相色譜- 同位素質(zhì)譜聯(lián)用)分析方法是正式的AOAC ( 分析家協(xié)會正式分析方法) 中編號為NO.998.12( 蜂蜜中C-4 植物糖含量的測定，1999)分析方法的進(jìn)一步發(fā)展，經(jīng)過幾年的研究，APPLICA 公司成功地完善了AOAC 方法中峰蜜中組份的常規(guī)檢測，并將其制定為國際認(rèn)證標(biāo)準(zhǔn)方法(ISO 17025)。盡管如此，某些種類的添加糖( 如甜菜中C-3 糖的測定) 不能被檢測，因此分析方法的完善顯得迫在眉睫，在用戶需求的推動下，APPLICA 公司于2005 年開始這項研究項目，并最終發(fā)展了LC-IRMS 這一分析技術(shù)。這一技術(shù)彌補了AOAC 方法中蜂蜜各組份如果糖、葡萄糖、二糖、三糖等13C/12C 同位素比值(d13C) 測定，LC-IRMS 這一革新在線聯(lián)用新分析方法可檢測AOAC 方法無法檢測的各種糖。

分析結(jié)果的解釋是建立在AOAC 分析方法及各種糖組份同位素組成的基礎(chǔ)之上，各種糖組份同位素的含量測定與AOAC 方法一致，表1 列出的是純蜂蜜中糖組份同位素含量及其變化范圍。

表1：純蜂蜜中糖組份 d 13 C( LC-IRMS)測定值（測定值是通過VPDB進(jìn)行校正的）

序號	測定項目	測定值（純蜂蜜）	參考文獻(xiàn)
1	蛋白質(zhì)中d 13 C值(P)	-27.5～ -25.5‰	White & Doner a,b
2	蜂蜜中d 13 C值(H)	-27.5～ -25.5‰	White & Doner a,b
3	蛋白質(zhì)與峰蜜中d 13 C Delta差值(P-H)	小于-1‰	White & Doner a,b
4	C-4糖含量 （計算）	小于7% （文獻(xiàn)值）	White & Winters c AOAC 998.12 d
5	果糖中d 13 C值 -與葡萄糖中d 13 C差值 -與二糖中d 13 C差值 -與三糖中d 13 C差值 -與蛋白質(zhì)中d 13 C差值	-27.5～ -25.5‰ -1～ +1‰ -2～ +2‰ -2～ +2‰ -2～ +2‰	摘自no.2 APPLICA,Cabanero et al. e APPLICA,Cabanero et al.e APPLICA APPLICA
6	葡萄糖中d 13 C值 -與果糖中d 13 C差值 -與二糖中d 13 C差值 -與三糖中d 13 C差值 -與蛋白質(zhì)中d 13 C差值	-27.5～ -25.5‰ -1～ +1‰ -2～ +2‰ -2～ +2‰ -2～ +2‰	摘自no.2 APPLICA,Cabanero et al.e APPLICA,Cabanero et al.e APPLICA APPLICA
7	二糖中d 13 C值 -與果糖中d 13 C差值 -與葡萄糖中d 13 C差值 -與三糖中d 13 C差值 -與蛋白質(zhì)中d 13 C差值	-27.5～ -25.5‰ -2～ +2‰ -2～ +2‰ -2～ +2‰ -2～ +2‰	摘自no.2 APPLICA,Cabanero et al.e APPLICA,Cabanero et al.e APPLICA APPLICA
8	三糖中d 13 C值 -與果糖中d 13 C差值 -與葡萄糖中d 13 C差值 -與二糖中d 13 C差值 -與蛋白質(zhì)中d 13 C差值	-27.5～ -25.5‰ -2～ +2‰ -2～ +2‰ -2～ +2‰ -2～ +2‰	摘自no.2 APPLICA APPLICA APPLICA APPLICA

近期出版的刊物中，Cabanero et al.d 用同樣方法測定了蜂蜜中的摻假糖，其測定條件比APPLICA 公司更為苛刻。表1 中測定值的不確定度為±0.3‰。

除d13C 同位素比值外，果糖/ 葡萄糖的比值，二糖及三糖的相對含量也可通過LC-IRMS 進(jìn)行測定( 見表2，第9~12 項)。當(dāng)分析花蜜中的組份時，這些組份的含量顯得非常有趣，它給出了潛在可能的摻假信息，文獻(xiàn)f,e 給出了果糖/ 葡萄糖比值的參考值，二糖與三糖的含量與純蜂蜜中測定值相吻合，表2 給出了純金合歡及花蜜中各組份的平均值及變化范圍，由表可以看出，這些測定都在表1中所列數(shù)據(jù)范圍之內(nèi)。

表 2 ：純金合歡及花蜜中糖組份 d 13 C( LC-IRMS) 測定值（測定值是通過 VPDB 進(jìn)行校正的）

序號	測定項目	純金合歡 (n=60)		純花粉及蜜汁 (n=196)
		平均值	范圍 (最小值/最大值)	平均值	范圍 (最小值/最大值)
1	蛋白質(zhì)中d 13 C值	-24.7‰	-25.5/-23.7‰	-25.4‰	-26.7/-22.7‰
2	蜂蜜中d 13 C值	-25.1‰	-25.6/-24.1‰	-25.7‰	-27.3/23.0‰
3	蛋白質(zhì)與蜂蜜中Delta d 13 C 差值	0.4%	-0.3/0.9‰	0.3‰	-0.9/1.5‰
4	C-4糖含量	0.1‰	0/1.9‰	0.3‰	0/5.7‰
5	果糖中d 13 C值 -與葡萄糖中d 13 C差值 -與二糖中d 13 C差值 -與三糖中d 13 C差值 -與蛋白質(zhì)中d 13 C差值	-25.1‰ -0.1‰ 0.2‰ -1.0‰ -0.4‰	-25.6/-23.9‰ -0.8/1.2‰ -1.0/1.5‰ -2.0/0.3‰ -1.1/0.7‰	-25.8‰ -0.1‰ 0.2‰ -0.7‰ -0.3‰	-27.5/-23.2‰ -0.8/1.1‰ 1.6/2.0‰ -2.0/1.1‰ -1.5/1.2‰
6	葡萄糖中d 13 C值 -與果糖中d 13 C差值 -與二糖中d 13 C差值 -與三糖中d 13 C差值 -與蛋白質(zhì)中d 13 C差值	-25.1‰ 0.1‰ 0.3‰ -1‰ -0.3‰	-25.8/-23.9‰ -1.2/0.8‰ -0.8/1.8‰ -1.8/0.4‰ -0.8/0.2‰	-25.7‰ 0.1‰ 0.3‰ -0.6‰ -0.3‰	-27.2/-22.7‰ -1.1/0.8‰ -1.8/2.0‰ -2.0/2.0‰ -2.0/1.7‰
7	二糖中d 13 C值 -與果糖中d 13 C差值 -與葡萄糖中d 13 C差值 -與三糖中d 13 C差值 -與蛋白質(zhì)中d 13 C差值	-25.3 -0.2‰ -0.3‰ -1.2‰ -0.6‰	-26.7/-23.9‰ -1.5/1.0‰ -1.8/0.8‰ -2.0/0.3‰ -1.9/0.5‰	-26.0‰ -0.2‰ -0.3‰ -0.9‰ -0.6‰	-27.5/-22.5‰ -2.0/1.6‰ -2.0/1.8‰ -2.0/2.0‰ -2.0/1.7‰
8	三糖中d 13 C值 -與果糖中d 13 C差值 -與葡萄糖中d 13 C差值 -與二糖中d 13 C差值 -與蛋白質(zhì)中d 13 C差值	-24.1‰ 1.0‰ 1.0‰ 1.2‰ 0.6‰	-25.3/-22.9‰ -0.3/2.0‰ -0.4/1.8‰ 0.3/2.0‰ -0.5/2.0‰	-25.1‰ 0.7‰ 0.6‰ 0.9‰ 0.4‰	-27.1/-22.6‰ -1.0/2.0‰ -1.1/2.0‰ -2.0/2.0‰ -1.2/1.2‰
9	果糖/葡萄糖比值	1.61	1.50/1.82	1.20	1.00/1.46
10	二糖相對含量（％）	8.9	5.2/13.7	6.1	1.2/14.0
11	三糖相對含量（％）	2.6	1.1/5.5	1.0	0/8.0

說明： 表中數(shù)據(jù)是通過已有的知識獲得的，其可靠性有待認(rèn)證，僅供參考。 備注： d 13 C: 表示待測樣品對標(biāo)準(zhǔn)樣品 13 C/ 12 C同位素比值的千分差


相關(guān)產(chǎn)品 ：
DELTA V 同位素質(zhì)譜儀
MAT253 氣體同位素質(zhì)譜儀

文獻(xiàn)來源：
[a] J.Apic.Res.17(1978)94-99, [b] J.Ass.Off.Anal.Chem.61(1978)746-750, [c] J.Ass.Off.Anal.Chem.72(1989)907-911, [d] AOAC Official Mothods of Analysis(19999),Chapter 44,27-30, [e] J.Agr.Food Chem.54(2006)9719-9727, [f] Apidologie 35(2004)38-81, [g] Swiss Food Manual (2004),Chapter 23A,Table 23A.7