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近年來,隨著細胞免疫治療的迅速發(fā)展,出現(xiàn)了Car-T以外的一些先進的免疫治療法,比如腫瘤浸潤療法TIL,γδ T細胞免疫療法,這些先進的癌癥治療方法引起了廣泛的關(guān)注。
TIL(Tumor Infiltrating Lymphocytes)療法,即腫瘤浸潤淋巴細胞療法,其大致流程是:從腫瘤患者體內(nèi)分離免疫活性細胞,在體外進行擴增和功能鑒定,然后向患者回輸,絕大多數(shù)TIL能夠靶向多種腫瘤抗原(每份回輸TIL平均1.4萬個TCR),克服了腫瘤異質(zhì)性的問題。TIL特異性識別腫瘤抗原,不識別正常組織,因此有著極其出眾的安全性。
γδ T細胞是一類獨特的T細胞,它們不僅具有傳統(tǒng)αβ T細胞的免疫功能,還能識別和殺傷腫瘤細胞,無需依賴主要組織相容性復(fù)合體(MHC)分子的呈遞,這使它們在腫瘤免疫逃逸中表現(xiàn)出獨特優(yōu)勢。
清輝聯(lián)諾近日宣布,其自主研發(fā)的全球靶向B7H3的異體通用型CAR-γδ T細胞注射液QH104A,已獲得美國FDA臨床試驗(IND)批準(zhǔn),并正式進入中國藥品監(jiān)管局CDE受理程序。這一創(chuàng)新療法的目標(biāo)是為復(fù)發(fā)或進展性高級別膠質(zhì)瘤患者帶來全新的治療希望。

無論是TIL還是γδ T細胞療法,它們的研究和應(yīng)用面臨著諸多挑戰(zhàn),其中之一便是細胞數(shù)量和質(zhì)量的精準(zhǔn)檢測,都需要解決細胞量的問題:通過優(yōu)化摸索細胞因子(IL2,IL15,IL21等),在幾周內(nèi)擴增出數(shù)百億甚至上千億的細胞,最大化地提高擴增效率。
“一刀切”的細胞因子配方可能無法在所有情況下都獲得最佳效果。不同的細胞因子組合的最佳濃度和最佳比例可能產(chǎn)生1+1>2的協(xié)同效應(yīng)(如IL-2+IL-15),也可能相互制約。同時,同一細胞因子在不同濃度或不同培養(yǎng)階段可能發(fā)揮不同作用,所以添加時機也很重要(例如IL-21)。
在這些細胞培養(yǎng)工藝優(yōu)化過程中,每天要面臨幾十甚至上百個細胞樣品的繁重的計數(shù)工作,所以一款高通量的自動化細胞計數(shù)儀就顯得尤為重要。艾貝泰提供全自動高通量細胞計數(shù)儀Countleader FL 2000,采用AOPI雙熒光法,17min可以計數(shù)24個樣品,幫助精確判斷T細胞的數(shù)量和活性,助力免疫細胞治療的生產(chǎn)工藝體系優(yōu)化。每個樣品成本僅為進口設(shè)備的1/4,實現(xiàn)真正意義上的降本增效。

1. 適用預(yù)包埋AO/PI染料的24通高通量耗材:微流體通道專利耗材,每孔僅需添加40μL細胞樣品,無需手動染色,減少手動操作帶來的誤差,提高細胞計數(shù)準(zhǔn)確性!17min可獲得24個樣品結(jié)果,加速探索、優(yōu)化生產(chǎn)工藝體系過程。

2. 內(nèi)置針對免疫細胞的小細胞分析方法,精確分割免疫細胞;耗材內(nèi)置AO/PI雙熒光染料,自動染色免疫細胞,不受紅細胞、血小板,磁珠、試劑等的干擾,不受人工誤差影響。
部分視野放大圖:A.AO/PI雙熒光圖片;B.明場圖片;C.算法識別圖
GFP 轉(zhuǎn)染效率檢測部分視野示意圖:1. 明場圖片(總細胞);2. 綠色熒光圖片(陽性細胞) 