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          MD實(shí)驗(yàn)案例下載 | 斑馬魚(yú)等模式生物高通量篩選方法

          瀏覽次數(shù):4642 發(fā)布日期:2018-8-31  來(lái)源:本站 本站原創(chuàng),轉(zhuǎn)載請(qǐng)注明出處

           

          斑馬魚(yú)等模式生物的高通量篩選方法介紹

           

          自從20世紀(jì)70年代美國(guó)俄勒岡大學(xué)的George Streisinger教授利用斑馬魚(yú)進(jìn)行遺傳學(xué)及發(fā)育生物學(xué)方面的研究以來(lái),斑馬魚(yú)已越來(lái)越多地被應(yīng)用于人類疾病的研究中。斑馬魚(yú)由于其與人類的高度生物相似性,成為了一種有用的藥物開(kāi)發(fā)模型。如專業(yè)從事斑馬魚(yú)臨床前藥物評(píng)價(jià)的Zygogen公司,使用ImageXpress系列高內(nèi)涵篩選系統(tǒng)進(jìn)行包括血管生成、毒性篩選等多個(gè)應(yīng)用方向的藥物評(píng)價(jià),使用斑馬魚(yú)模型對(duì)化合物進(jìn)行多濃度梯度的劑效關(guān)系的研究,并繪制需要至少十個(gè)以上樣品才能準(zhǔn)確擬合的Dose-Response曲線并計(jì)算得到IC50。此外,由于斑馬魚(yú)體積小,所以可以放入微孔板中用化合物處理,然后其表型能使用高內(nèi)涵篩選系統(tǒng)來(lái)進(jìn)行檢測(cè)。

           

          基于斑馬魚(yú)的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)應(yīng)用有大量的已開(kāi)發(fā)的人類疾病斑馬魚(yú)模型如:
          1.代謝綜合癥:肥胖 (內(nèi)臟肥胖)、 血脂異常、脂肪肝、糖耐受失調(diào)
          2.人類癌癥細(xì)胞異種移植:腫瘤血管生成、遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移
          3.循環(huán)疾病:心力衰竭、藥物誘導(dǎo)的心率失調(diào)
          4.中央神經(jīng)系統(tǒng)失調(diào):耳聾、視力障礙、嗅覺(jué)失調(diào)、癲癇、發(fā)育紊亂、睡眠喚醒障礙、肌營(yíng)養(yǎng)不良 (ALS)

           

           

          使用ImageXpress系列高內(nèi)涵篩選系統(tǒng)來(lái)檢測(cè)斑馬魚(yú)胚胎模型具備以下三個(gè)主要優(yōu)勢(shì):
          - 高效率:使用完整生命體在三維環(huán)境下幾天就能評(píng)價(jià)成千上萬(wàn)的化合物
          - 高靈活性:高內(nèi)涵適合篩選很寬范圍的疾病和毒性模型,甚至不局限于斑馬魚(yú)
          - 高質(zhì)量:通過(guò)自動(dòng)化高速Z 堆疊拍攝從頭到尾保持拍攝在最佳焦平面,避免景深帶來(lái)的不清晰

           

           

           

          參考文獻(xiàn):
          1. Zhang, B., et al., Quantitative phenotyping-based in vivo chemical screening in a zebrafish model of leukemia stem cell xenotransplantation, PLoS One,2014 Jan 15; 9(1).
          2. Umemoto, N., et al., Fluorescent-based methods for gene knockdown and functional cardiac imaging in zebrafish, Mol Biotechnol, 2013 Oct; 55(2): 131-42.
          3. Kanungo, J., et al., In vivo imaging and quantitative analysis of changes in axon length using transgenic zebrafish embryos. Neurotoxicol Teratol, 2011 Nov-Dec; 33(6): 618-23.
          4. Diekmann, H., et al., Characterization of optic nerve regeneration using transgenic zebrafish. Front Cell Neurosci, 2015 April 9; 9:118.
          5. Huan, H., et al., High-throughput screening for bioactive molecules using primary cell culture of transgenic zebrafish embryos. Cell Rep, 2012 Sep 27;2(3):695-704.

           

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