科潤達生物推出一步裂解法全血基因組DNA純化試劑

瀏覽次數：1367　發布日期：2009-12-8　來源：本站　本站原創，轉載請注明出處

一步裂解法全血基因組DNA提取試劑簡介

1．本試劑盒技術指標：

· 試劑盒由單管紅細胞及細胞核復合裂解液、蛋白沉淀液以及DNA溶解液組成。

· 可以同時從全血中提取人基因組DNA、線粒體DNA（mtDNA）以及病毒DNA。

· 整個提取過程不超過45分鐘。

· 全血基因組提取過程包括：1裂解紅細胞及有核白細胞。2鹽析沉淀蛋白，分離基因組。3異丙醇沉淀脫鹽并濃縮。4 70%乙醇清洗，晾干并用DNA溶解液溶解。

· 本試劑盒采用單管紅細胞及細胞核復合裂解液，省去了第一代產品的裂解并去除紅細胞的步驟，其中含有抑制DNA酶的成分，在加熱（65°C）狀態下，可保證完整的人基因組DNA、線粒體DNA（mtDNA）以及病毒DNA的充分裂解釋放，異丙醇沉淀時，罕見渾濁的蛋白質雜質的共沉淀。

· 用于DNA提取的全血應為抗凝血（EDTA, 肝素或檸檬酸鈉抗凝），抗凝血在-20°C存放一個月以內，避免反復凍融, 4°C存放7天以內，均能純化出高質量的DNA。-80°C條件下，樣本至少可存放2年。

· 本試劑提取的基因組DNA長度大于20kb, 可用于PCR擴增、內切酶消化以及膜雜交等。

· 試劑盒在室溫下保存1年。

2. 操作流程：

DNA 溶解液溶解

200ul，70%乙醇清洗

單管全血100ul與裂解液加熱（65°C）裂解20分鐘

200ul蛋白沉淀液，離心沉淀

取上清，加等量異丙醇，離心沉淀，棄上清

3．一步裂解法全血基因組DNA提取試劑與promega全血基因組DNA提取試劑的比較

10個100ul，-20°C保存1周的全血樣本分別用promega試劑（1、2、3號樣本）以及一步裂解法全血基因組DNA提取試劑（4-10號樣本）純化的基因組DNA電泳。11號為λ/HinderIII分子量 marker。

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